【摘 要】
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目的:建立一种简便、有效的幽门螺杆菌(H.pylori)的液体培养法。方法:取脑心浸液9 m L、胎牛血清1 m L、H.pylori选择剂(万古霉素、头孢磺啶、甲氧氨苄嘧啶及两性霉素B)400μ
【机 构】
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贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室,贵州贵阳550004贵州医科大学分子生物学重点实验室,贵州贵阳550004;
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目的:建立一种简便、有效的幽门螺杆菌(H.pylori)的液体培养法。方法:取脑心浸液9 m L、胎牛血清1 m L、H.pylori选择剂(万古霉素、头孢磺啶、甲氧氨苄嘧啶及两性霉素B)400μL制成H.pylori液体培养基,将H.pylori接种于H.pylori液体培养基,在厌氧罐中通过微需氧袋建立微需氧条件,于37℃振荡培养3 d,同时设立传统固体培养基培养的H.pylori作为对照;观察2种方法培养的H.pylori生长状况及H.pylori形态,比较2种方法培养的H.pylori的尿素酶、氧化酶及触酶试验结果。结果:固体培养到第3天时,H.pylori生长良好,哥伦比亚血琼脂平板上见透明、针尖样菌落形态;液体培养第3天时可见培养基明显浑浊,涂抹少量菌液于无抗生素的哥伦比亚血琼脂平板培养,肉眼未见污染菌生长,并有透明、针尖样的菌落长出;革兰染色后,固体培养基中的H.pylori为螺旋状、海鸥状、S状弯曲菌或短杆菌;液体培养基中的H.pylori则多为螺旋短杆状、亦见部分长丝状细菌,有的互相缠绕聚集成团,有的散在分布;取两种方法培养的H.pylori菌进行尿素酶、氧化酶及触酶试验,结果均为阳性。结论:成功建立一种简便、有效的H.pylori液体培养法,细菌生长良好,且H.pylori形态变长。
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