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目的:建立同时测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的高效液相色谱法。方法:采用Sun FireTM C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水(B),梯度洗脱(06 min,10%A→15%A;67 min,15%A;710 min,15%A→16%A;1015 min,16%A;1520 min,16%A→30%A;2035 min,30%A→33%A;3538 min,33%A→38%A;3860 min,38%A→48%A),流速为1.0 m L·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果:龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量浓度分别在2.5100μg·m L-1(r=0.999 6)、2.5100μg·m L-1(r=0.999 6)、5200μg·m L-1(r=0.999 6)、2.5100μg·m L-1(r=0.999 7)、5200μg·m L-1(r=0.999 5)、2.5100μg·m L-1(r=0.999 6)、1.2550μg·m L-1(r=0.999 8)和1.2550μg·m L-1(r=0.999 8)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为99.4%、99.2%、99.3%、98.7%、99.6%、98.7%、98.2%和98.0%。6批样品中上述8个成分的含量范围分别为龙胆苦苷1.7001.717 mg·g-1,獐牙菜苦苷0.5240.544 mg·g-1,京尼平苷3.6743.883 mg·g-1,京尼平龙胆双糖苷1.6951.701 mg·g-1,黄芩苷7.2357.440 mg·g-1,汉黄芩苷1.2331.275 mg·g-1,黄芩素0.5140.523 mg·g-1,汉黄芩素0.2940.298 mg·g-1。结论:该方法可用于龙胆泻肝丸的质量控制。