【摘 要】
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本试验旨在构建并获得共表达PCV2/PCV3 Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs).扩增PCV2 Cap及PCV3 Cap基因,将其克隆至pEASY-Blunt载体,分别命名为pEPC2、pEPC3,验证正确后将目的基因分别连接至杆状病毒双启动子表达载体pFastBaC-Dual,获得含有PCV2、PCV3 Cap基因的重组杆状病毒质粒pFBD-PC2-PC3.将该重组质粒转化至大肠杆菌DH10-BacTM感受态细胞,进行蓝白斑筛选与PCR鉴定,获得重组杆粒Bacm
【机 构】
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吉林大学动物科学学院,吉林长春130062;中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元,中国农业科学院长春兽医研究所,吉林长春130122;中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单
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本试验旨在构建并获得共表达PCV2/PCV3 Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs).扩增PCV2 Cap及PCV3 Cap基因,将其克隆至pEASY-Blunt载体,分别命名为pEPC2、pEPC3,验证正确后将目的基因分别连接至杆状病毒双启动子表达载体pFastBaC-Dual,获得含有PCV2、PCV3 Cap基因的重组杆状病毒质粒pFBD-PC2-PC3.将该重组质粒转化至大肠杆菌DH10-BacTM感受态细胞,进行蓝白斑筛选与PCR鉴定,获得重组杆粒Bacmid-PC2-PC3.利用脂质体将Bacmid-PC2-PC3转染至SF9细胞进行病毒拯救,转染后72 h收取上清病毒液,并盲传3代.用其感染Sf9细胞,通过间接免疫荧光及Western blot验证目的蛋白是否表达;同时收集感染后的Sf9细胞上清,在电镜下观察是否形成VLPs.结果显示,成功构建了共表达PCV2/PCV3 Cap蛋白的重组质粒,并获得重组杆粒,拯救出重组杆状病毒.病毒感染Sf9细胞后,目的蛋白获得表达且具有反应原性,能够形成VLPs.本研究成功制备了共表达PCV2/PCV3 Cap蛋白的VLPs,为深入开展猪圆环病毒二价新型疫苗研发奠定了坚实基础.
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摘 要：新时期煤矿发展日新月异，对女职工素质也有了新的要求。本文围绕女职工素质建设，探索其提升途径和方法，从而更好地发挥女职工在煤矿发展建设中的作用，维护矿区稳定，促进矿区和谐发展。 关键词：女职工;素质建设 女职工是煤矿企业职工队伍的重要组成部分，在企业发展中起着重要的作用。女职工素质的提高，更有利于煤矿安全、稳定、和谐发展。如何提高煤矿女职工素质？笔者结合工作实际谈几点看法。 1.提高女
摘 要：山西是我国典型的资源型大省，是我国重要的能源和原材料供应基地，长期以来为国家能源供应和现代化建设作出了突出贡献。阳泉市是全国最大的无烟煤生产基地，随着近年来煤炭资源不断被开发，矿产资源日益枯竭，在开采过程形成的人口、资源、环境与经济发展的矛盾突出，如何完成资源型城市的转型跨越发展，实现产业结构的合理升级，走循环经济发展道路，是阳泉市经济发展面临的重要课题。 关键词：资源型城市；转型；阳泉