【摘 要】
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目的:研究人参败毒散调控AMPK/ULK1自噬通路抑制溃疡性结肠炎小鼠黏膜屏障损伤的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组,分为正常组,模型组,阳性药组,人参败毒散高、中、低剂量组。通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/50%乙醇诱导UC模型,柳氮磺胺吡啶肠溶片(0.3125 g/kg),人参败毒散高(31.2g/kg)、中(15.6g/kg)、低剂量(7.8g/kg)灌胃2周后,检测结
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(82074327); 四川省科学技术项目(2018JY0446);
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目的:研究人参败毒散调控AMPK/ULK1自噬通路抑制溃疡性结肠炎小鼠黏膜屏障损伤的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组,分为正常组,模型组,阳性药组,人参败毒散高、中、低剂量组。通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/50%乙醇诱导UC模型,柳氮磺胺吡啶肠溶片(0.3125 g/kg),人参败毒散高(31.2g/kg)、中(15.6g/kg)、低剂量(7.8g/kg)灌胃2周后,检测结肠组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测腺苷酸活化蛋白(AMPKα)mRNA表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测紧密连接蛋白中咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白-2(Claudin-2),自噬标志蛋白p62、微管相关蛋白轻链3(LC3B)及AMP活化蛋白激酶/Unc-51样激酶1(AMPK/ULK1)通路磷酸化蛋白p-AMPK、p-ULK1的表达水平。结果:与正常组比较,模型组结肠损伤评分明显上调(P<0.05),AMPKα mRNA表达下调(P<0.05),p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3II/I值下调(P<0.05),而p62、Claudin-2蛋白水平上调(P<0.05)。与模型组比较,人参败毒散高、中、低剂量组(简称败毒散-H、M、L组)的结肠损伤评分下降,AMPKαmRNA见上调,p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3II/I值上升,而p62、Claudin-2蛋白表达下降,以败毒散-M组干预效应明显(P<0.05)。结论:人参败毒散可抗肠道黏膜屏障损伤,以败毒散-M组疗效最佳,其机制可能与激活AMPK/ULK1自噬通路有关,通过加速LC3I向LC3II转化,促p62降解,从而改善紧密连接蛋白Occludin、Claudin-2功能,修复肠道机械屏障损伤。
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