日本血吸虫SjPP基因重组杆状病毒的构建和在昆虫细胞中的表达

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：littlewolfwolfwolf

【摘要】

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目的在昆虫细胞中表达获得可溶性的日本血吸虫SjPP重组蛋白。方法提取日本血吸虫成虫总RNA．通过RT-PCR扩增出町PP基因的编码区序列，将其定向克隆到供体质粒pFastBac HT-B中，构建

【作者】

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姚利晓陶丽红杨冠珍吴祥甫蔡幼民林矫矫

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所,中国科学院上海生命科学研究院上海生化细胞所,西南大学柑桔研究所

【出处】

：

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

日本血吸虫 SjPP Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 Schistosoma japonicum SjPP Bac-to-Bac Baculovirus

【基金项目】

：

国家“863”计划（N0.2006AA10A207）,国家科技支撑计划（No.2006-BAD06A09）

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目的在昆虫细胞中表达获得可溶性的日本血吸虫SjPP重组蛋白。方法提取日本血吸虫成虫总RNA．通过RT-PCR扩增出町PP基因的编码区序列，将其定向克隆到供体质粒pFastBac HT-B中，构建重组杆状病毒供体质粒pFastBac-SjPP，转化入大肠埃希菌DHIOBac进行转座，提取重组杆粒Bacmid-SjPP，用阳离子脂质体法转染粉纹夜蛾（TN5BI-4）细胞。利用十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析重组蛋白表达情况。结果构建了含

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