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目的
探讨热打击对体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)细胞骨架及细胞周期的影响。
方法体外培养HUVEC,并分别置于37 ℃、5%CO2培养箱(对照组)或43 ℃细胞培养箱(热打击组)培养1 h。采用考马斯亮蓝R-250染色法,高倍镜下观察热打击对HUVEC细胞骨架的影响。热打击组细胞培养1 h后继续置于37℃、5%CO2培养箱孵育,分别于0、6、12、18、24 h采用流式细胞仪检测热打击对HUVEC细胞周期的影响。
结果镜下观察对照组HUVEC细胞骨架形态正常;热打击组随热打击时间的延长,细胞骨架逐渐增粗、变短,且出现明显的应力纤维。对照组细胞G0/G1期DNA含量为48.57%,S期为44.62%,G2/M期为6.81%。在热打击后HUVEC细胞各时间点G0/G1期DNA含量为38.07%~55.19%,热打击后0、6、12、18、24 h组分别为54.06%、55.19%、48.23%、38.07%和41.03%;S期DNA含量为35.33%~48.18%,热打击后0、6、12、18、24 h组分别为35.33%、39.50%、42.50%、48.18%和47.99%;G2/M期DNA含量为5.31%~13.75%,热打击后0、6、12、18、24 h组分别为10.61%、5.31%、9.27%、13.75%和10.98%。说明当HUVEC细胞离开热打击环境后,G0/G1期DNA含量在6 h内明显高于对照组,至12 h时才恢复至对照组水平。
结论热打击可改变HUVEC细胞骨架结构,且细胞周期出现阻滞,细胞被阻滞在G0/G1期。