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摘 要 目的:通过测定脑肿瘤患者围手术期输血对免疫功能的影响为临床脑肿瘤患者谨慎输血提供依据。方法:脑肿瘤患者6例行根治性切除术随机分为输血组6例、未输血组15例、健康对照组例分别应用酶联免疫吸附试验测定IgG、IgM、IgA、C、C应用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CD/CD8T细胞比值、N细胞。结果:输血组输血前体液免疫指标与健康对照组比较无显著性差异;术后天与术前相比有显著性差异(P<.5)术后第1天、天与第天相比无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。未输血组输血前与健康对照组亦无显著性差异;术后第天、1天与术前比较差异显著(P<.5或.1);术后第天基本恢复至术前水平。组间相比:术后第天未输血组IgG、IgM、IgA、C、C明显高于输血组(P<.5)。代表细胞免疫的指标输血组输血前与健康对照组无显著性差异;术后天与术前相比有著性差异(P<.5)术后第1g天、天与第天相比无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。未输血组输血前与健康对照组亦无显著性差异:术后第天该值明显减少(P<.5或.1)但CD8变化不显著;术后第1天基本恢复至术前水平。组间相比:术前及输血前该值无差异。术后第天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值与输血组比较(P<.5)CD8T无差异。术后第1天、天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞明显高于输血组(P<.5)。结论:围手术期输血对脑肿瘤患者的免疫功能有较强的抑制作用因此临床上对该类患者输血应慎重。
关键词 输血 脑肿瘤 免疫功能
对象与方法
年月～年6月收治脑肿瘤患者78例6例行根治性切除术失访例。纳入本研究61例。年龄1～79岁平均6岁。其中男9例女1例。根据术前天到术后天内有无输血史分为三组:输血组6例包括胶质瘤8例垂体瘤18例;未输血组15例包括胶质瘤1例垂体瘤例。手术前个月内均无输血史术前及术后天内均未予放、化疗和免疫治疗。输血组围手术期输血量±ml均为库存红细胞悬液。各组手术时间196±分钟术中出血量及输液量相比无显著性差异。健康对照组例。三组均在术前、术后天、1天、天分别抽静脉血备检。手术均采用静脉复合麻醉。组间性别、年龄、术式及病理類型相比均无显著性差异(P>.5)健康对照组血液来源于体检者性别及年龄与上两组差异无显著性(P>.5)。
免疫球蛋白及补体检测方法:于术前、术后天、1天、天分别采取患者空腹外周静脉血立即分离血清-℃保存输血组均在术中输血。免疫球蛋白及补体检测方法酶联免疫吸附试验试剂盒具体步骤参照说明书。
T细胞亚群检测方法:血液标本应用.5%的胰酶消化成单细胞悬液离心室温PBS洗涤次75%冷乙醇固定小时以上离心弃去乙醇PBS洗涤次加5μg/ml PI染液1ml反应至少分钟用目尼龙网过滤立即上流式细胞仪检测。
统计学于处理:各组数据用均数±标准差(X±S)表示。组间比较进行单因素方差分析P<.5为有统计学意义。
结 果
围手术期免疫球蛋白的变化:健康对照组IgG、IgM、IgA、C、C其值分别为:8.17±1.6、6.97±.65、.66±.5、.5±665.、597.56±.19。
输血组输血前IgG、IgM、IgA、C、C与健康对照组比较无显著差异;术后天与术前相比, IgG、IgM、IgA、C、C显著性减少(P<.5)术后第1天、天与第天相比IgG、IgM、IgA、C、C无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。
未输血组输血前IgG、IgM、IgA、C、C与健康对照组差异亦无显著性;术后第天、1天IgG、IgM、IgA、C、C与术前比较(P<.5或.1);术后第天IgG、IgM、IgA、C、C基本恢复至术前水平。
组间相比:术前及输血前的IgG、IgM、IgA、C、C无差异:术后第天、1天未输血组IgC、IgM、IgA、C与输血组比较(P<.5):术后第天未输血组IgG、IgM、IgA、C、C明显高于输血组(P<.5)。见表1。
围手术期CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞的变化:健康对照组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞的量分别为78.9±1.1、.±6.、5.5±.8、1.87±.86、15.1±1.98。
输血组输血前CDT细胞、CDT细胞、CD8T知胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞与健康对照组无显著性差异;术后天与术前相比CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞显著性减少(P<.5)CD8T变化不显著:术后第1天、天与第天相比CDT细胞、CD1T细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。
未输血组输血前CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞与健康对照组亦无显著性差异;术后第天CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CD/CD8T细胞比值、N细胞减少(P<.5或.1)CD8T细胞变化不显著:术后第1天CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞基木恢复至术前水平。
组间相比:术前及输血前的CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞无差异;术后第天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值与输而组比较(P<.5)CD8T细胞无差异:术后第1、天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞明显高于输血组(P<.5)。
讨 论
临床观察发现带瘤情况下血中抗体的效价很低切除肿瘤后抗体的效价上升的病人预后较好在复发转移后抗体的效价又重新下降这说明肿瘤患者抗肿瘤抗休的水平与病情和预后有一定的关系定期对患者免疫功能进行检测对了解病情和判断预后具有一定的参考价值。
动物实验、大量临床研究表明输血对多种肿瘤细胞生长有促进作用并证明了含白细胞成分的血液及血浆对肿瘤生长的促进作用比红细胞明显。
本试验选用能够代表机体体液免疫状态的IgG、IgM、IgA、C、C作为检测指标在输血后1天下降的原因有:手术对患者免疫功能的抑制作用在术后、天已经减弱输血强化了手术对机体免疫功能的抑制。
通过本试验表明脑肿瘤患者在围手术期输血可引起机体细胞及体液免疫功能的下降同时由于手术对患者也是一种创伤所以两组在术后均出现免疫功能的下降。但手术的影响是暂时的在术后1天该组患者免疫力可得到恢复并预测了患者良好的生存率;由于输血的长期抑制输血组免疫力在术后天仍无法恢复从而对病情产生影响。输血对肿瘤病人免疫功能抑制的机制尚不完全清楚。研究发现同种输血具有抑制肿瘤病人体内NO产生的作用。NO可作为介质或细胞功能调节因子来介导或参与许多生理和病理过程特别是巨噬细胞毒作用及免疫调节作用对于机体抗肿瘤具有重要意义:同种输血导致NO生成减少从而使辅助性T细胞(CD)减少抑制性T细胞(CD8)增加CDT/CD8T 的比值下降N细胞和巨噬细胞杀伤肿瘤的功能降低最终导致机体抗肿瘤能力减弱。还有一种理论认为当病人免疫系统受到严重抑制时缺乏识别和清除异体淋巴细胞的能力发生输血相关性移植物抗宿主反应。目前已经公认输血引起的免疫抑制主要是由输入血液中的白细胞造成。因而采用滤器祛除白细胞输血即可以减少对受血者的免疫抑制作用。同时血浆和全血中含有免疫抑制因子。
本实验研究证实血液中存在的免疫抑制作用在短期内不宜消除可能促进肿瘤复发及降低术后远期生存率。本组病例术后时间较短围手术期输血对其远期生存率的影响还有待进一步随访观察。
鉴于输血对病人免疫功能的抑制作用我们认为:脑肿瘤病人在围手术期内应尽可能避免输血。如必须输血应采用滤器祛除白细胞输血、自体输血、血液代用品以减少对机体的免疫抑制作用。
关键词 输血 脑肿瘤 免疫功能
对象与方法
年月～年6月收治脑肿瘤患者78例6例行根治性切除术失访例。纳入本研究61例。年龄1～79岁平均6岁。其中男9例女1例。根据术前天到术后天内有无输血史分为三组:输血组6例包括胶质瘤8例垂体瘤18例;未输血组15例包括胶质瘤1例垂体瘤例。手术前个月内均无输血史术前及术后天内均未予放、化疗和免疫治疗。输血组围手术期输血量±ml均为库存红细胞悬液。各组手术时间196±分钟术中出血量及输液量相比无显著性差异。健康对照组例。三组均在术前、术后天、1天、天分别抽静脉血备检。手术均采用静脉复合麻醉。组间性别、年龄、术式及病理類型相比均无显著性差异(P>.5)健康对照组血液来源于体检者性别及年龄与上两组差异无显著性(P>.5)。
免疫球蛋白及补体检测方法:于术前、术后天、1天、天分别采取患者空腹外周静脉血立即分离血清-℃保存输血组均在术中输血。免疫球蛋白及补体检测方法酶联免疫吸附试验试剂盒具体步骤参照说明书。
T细胞亚群检测方法:血液标本应用.5%的胰酶消化成单细胞悬液离心室温PBS洗涤次75%冷乙醇固定小时以上离心弃去乙醇PBS洗涤次加5μg/ml PI染液1ml反应至少分钟用目尼龙网过滤立即上流式细胞仪检测。
统计学于处理:各组数据用均数±标准差(X±S)表示。组间比较进行单因素方差分析P<.5为有统计学意义。
结 果
围手术期免疫球蛋白的变化:健康对照组IgG、IgM、IgA、C、C其值分别为:8.17±1.6、6.97±.65、.66±.5、.5±665.、597.56±.19。
输血组输血前IgG、IgM、IgA、C、C与健康对照组比较无显著差异;术后天与术前相比, IgG、IgM、IgA、C、C显著性减少(P<.5)术后第1天、天与第天相比IgG、IgM、IgA、C、C无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。
未输血组输血前IgG、IgM、IgA、C、C与健康对照组差异亦无显著性;术后第天、1天IgG、IgM、IgA、C、C与术前比较(P<.5或.1);术后第天IgG、IgM、IgA、C、C基本恢复至术前水平。
组间相比:术前及输血前的IgG、IgM、IgA、C、C无差异:术后第天、1天未输血组IgC、IgM、IgA、C与输血组比较(P<.5):术后第天未输血组IgG、IgM、IgA、C、C明显高于输血组(P<.5)。见表1。
围手术期CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞的变化:健康对照组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞的量分别为78.9±1.1、.±6.、5.5±.8、1.87±.86、15.1±1.98。
输血组输血前CDT细胞、CDT细胞、CD8T知胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞与健康对照组无显著性差异;术后天与术前相比CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞显著性减少(P<.5)CD8T变化不显著:术后第1天、天与第天相比CDT细胞、CD1T细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞无显著变化但明显低于术前水平(P<.5)。
未输血组输血前CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞与健康对照组亦无显著性差异;术后第天CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CD/CD8T细胞比值、N细胞减少(P<.5或.1)CD8T细胞变化不显著:术后第1天CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞基木恢复至术前水平。
组间相比:术前及输血前的CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞无差异;术后第天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值与输而组比较(P<.5)CD8T细胞无差异:术后第1、天未输血组CDT细胞、CDT细胞、CD8T细胞、CDT/CD8T细胞比值、N细胞明显高于输血组(P<.5)。
讨 论
临床观察发现带瘤情况下血中抗体的效价很低切除肿瘤后抗体的效价上升的病人预后较好在复发转移后抗体的效价又重新下降这说明肿瘤患者抗肿瘤抗休的水平与病情和预后有一定的关系定期对患者免疫功能进行检测对了解病情和判断预后具有一定的参考价值。
动物实验、大量临床研究表明输血对多种肿瘤细胞生长有促进作用并证明了含白细胞成分的血液及血浆对肿瘤生长的促进作用比红细胞明显。
本试验选用能够代表机体体液免疫状态的IgG、IgM、IgA、C、C作为检测指标在输血后1天下降的原因有:手术对患者免疫功能的抑制作用在术后、天已经减弱输血强化了手术对机体免疫功能的抑制。
通过本试验表明脑肿瘤患者在围手术期输血可引起机体细胞及体液免疫功能的下降同时由于手术对患者也是一种创伤所以两组在术后均出现免疫功能的下降。但手术的影响是暂时的在术后1天该组患者免疫力可得到恢复并预测了患者良好的生存率;由于输血的长期抑制输血组免疫力在术后天仍无法恢复从而对病情产生影响。输血对肿瘤病人免疫功能抑制的机制尚不完全清楚。研究发现同种输血具有抑制肿瘤病人体内NO产生的作用。NO可作为介质或细胞功能调节因子来介导或参与许多生理和病理过程特别是巨噬细胞毒作用及免疫调节作用对于机体抗肿瘤具有重要意义:同种输血导致NO生成减少从而使辅助性T细胞(CD)减少抑制性T细胞(CD8)增加CDT/CD8T 的比值下降N细胞和巨噬细胞杀伤肿瘤的功能降低最终导致机体抗肿瘤能力减弱。还有一种理论认为当病人免疫系统受到严重抑制时缺乏识别和清除异体淋巴细胞的能力发生输血相关性移植物抗宿主反应。目前已经公认输血引起的免疫抑制主要是由输入血液中的白细胞造成。因而采用滤器祛除白细胞输血即可以减少对受血者的免疫抑制作用。同时血浆和全血中含有免疫抑制因子。
本实验研究证实血液中存在的免疫抑制作用在短期内不宜消除可能促进肿瘤复发及降低术后远期生存率。本组病例术后时间较短围手术期输血对其远期生存率的影响还有待进一步随访观察。
鉴于输血对病人免疫功能的抑制作用我们认为:脑肿瘤病人在围手术期内应尽可能避免输血。如必须输血应采用滤器祛除白细胞输血、自体输血、血液代用品以减少对机体的免疫抑制作用。