【摘 要】
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目的构建登革2型病毒(DENV2)NS1基因的真核表达载体,为筛选与NS1相互作用的蛋白以及研究机体抵抗登革病毒感染的作用机制奠定基础。方法以DENV2感染THP1细胞的c DNA为模板,采
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目的构建登革2型病毒(DENV2)NS1基因的真核表达载体,为筛选与NS1相互作用的蛋白以及研究机体抵抗登革病毒感染的作用机制奠定基础。方法以DENV2感染THP1细胞的c DNA为模板,采用RT-PCR法扩增具有Flag标签的NS1全长基因,并将其克隆至p SG5质粒中,构建p SG5-NS1-Flag真核表达载体。筛选阳性克隆,分别进行酶切及测序鉴定。采用脂质体转染法将真核表达载体分别转染293T细胞和A549细胞,Western blotting法检测细胞NS1蛋白表达。结果扩增后具有Flag标签的
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