【摘 要】
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目的探讨影响人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成功培养的相关因素,以期提高其培养成功率.方法脐血依胎龄分为3组:40周胎龄组(n=11);36周胎龄组(n=6);32周及
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目的探讨影响人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成功培养的相关因素,以期提高其培养成功率.方法脐血依胎龄分为3组:40周胎龄组(n=11);36周胎龄组(n=6);32周及其以下胎龄组(n=5).采用相对适宜的条件培养,观察能成功培养出MSCs的比率,探讨脐血MSCs培养与胎龄、脐血单个核细胞数量(mononuclear cells,MNCs)、脐血容量之间的相关关系,以及各因素之间可能存在的相关关系.通过检测脐血MSCs的生长曲线、细胞群体倍增时间、成纤维细胞集落形成数目(fibroblast colony forming unit,CFU-F)、表面标志的表达来观察脐血MSCs细胞的生物学特性.结果脐血MSCs培养成功率达54.5%.MSCs培养成功与否与接种于培养瓶内脐血MNCs数量密切相关,脐血MNCs接种数量在1.25×108/L以上者培养成功率达83.3%.单位体积内脐血MNCs含量与胎龄呈负相关.小胎龄者脐血MSCs成集落能力(CFU-F数目)高于大胎龄.流式细胞术检测显示,在原代培养细胞增殖期末间充质干细胞的重要表面标志CD29有62.1%的表达,传1代细胞表达CD29、CD1o5分别为78.3%和85.0%;造血系统的表面标志CD34、CD45则始终在3.0%以下.结论脐血MNCs的接种数量在1.25×108/L以上可以提高培养的成功率.相同容量内脐血MNCs与胎龄呈负相关,且脐血MSCs样细胞集落形成能力(CFU-F计数)小胎龄者高于大胎龄,可能是小胎龄脐血MSCs相对容易培养成功的原因之一.
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