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目的 观察缺氧后处理(PC)对缺氧/复氧心肌细胞凋亡的影响及氧自由基清除剂[超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)]后处理对PC抗凋亡效应的影响,探讨PC中线粒体氧化应激平衡对细胞膜和线粒体Bcl-2和Bax蛋白调控心肌细胞凋亡的作用.方法 大鼠乳鼠心肌细胞缺氧3h后,分别进行:(1)复氧6h(缺氧/复氧组,H/R组),(2)复氧5min、缺氧5min,反复3次,再复氧6 h(PC组),(3)应用SOD 100 U/ml后立即进行(2)的操作(SOD +PC组),(4)应用CAT 120U/ml后立即进行(2)的操作(CAT+ PC组),(5)应用SOD联合CAT后立即进行(2)的操作(SOD+CAT+ PC组),对照组心肌细胞在复氧条件下培养9h.应用荧光探针测定线粒体活性氧含量,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测细胞膜和线粒体Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果 H/R组线粒体活性氧含量(61.53±4.73)显著高于对照组(13.25±1.07)和PC组(32.72±2.86),分别是他们的4.6和1.9倍(P均＜0.01),SOD+ PC组(23.05±1.13)、CAT+ PC组(23.82±1.88)和SOD+ CAT +PC组(16.58±0.74)则明显低于PC组(P均＜0.01),SOD+ PC组与CAT+ PC组比较差异无统计学意义(P＞0.05).各处理组心肌细胞凋亡率均显著高于对照组(P均＜0.01),SOD+CAT+ PC组[(44.60±3.12)％]和H/R组[(45.55±3.75)％]显著高于PC组[(26.42±2.96)％]、SOD+PC组[(26.01±4.24)％]和CAT+ PC组[(26.98±3.66)％],P均＜0.01,PC组、SOD+ PC组和CAT +PC组比较差异无统计学意义(P＞0.05).PC组、SOD+ PC组和CAT+ PC组细胞膜和线粒体Bcl-2蛋白表达水平显著高于对照组(P均＜0.01),Bax蛋白表达水平则显著低于对照组(P均＜0.01).H/R组和SOD+ CAT +PC组Bcl-2蛋白表达水平显著低于对照组(P均＜0.01),Bax蛋白表达水平显著高于对照组(P均＜0.01).结论 PC抑制线粒体活性氧爆发,减轻缺氧复氧心肌细胞凋亡,其抗凋亡机制可能与线粒体和细胞膜Bcl-2蛋白表达上调和Bax蛋白表达下调有关.单独应用SOD或CAT不影响PC抗凋亡作用,而二者联合则减弱PC抗凋亡作用.线粒体活性氧在PC的心脏保护作用发挥着重要作用.