【摘 要】
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目的评价烟酰胺腺嘌呤二核甘酸磷酸氧化酶2(NOX2)在布比卡因致神经细胞活性氧(ROS)合成中的作用。方法将SH-SY5Y细胞接种于培养板,采用随机数字表法分为4组(n=11):siRNA阴性对照组(NC组)、siRNA阴性对照+布比卡因组(NC+B组)、NOX2 siRNA组和NOX2 siRNA+布比卡因组(NOX2 siRNA+B组)。NC组和NOX2 siRNA组分别采用negative
【机 构】
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目的评价烟酰胺腺嘌呤二核甘酸磷酸氧化酶2(NOX2)在布比卡因致神经细胞活性氧(ROS)合成中的作用。
方法将SH-SY5Y细胞接种于培养板,采用随机数字表法分为4组(n=11):siRNA阴性对照组(NC组)、siRNA阴性对照+布比卡因组(NC+B组)、NOX2 siRNA组和NOX2 siRNA+布比卡因组(NOX2 siRNA+B组)。NC组和NOX2 siRNA组分别采用negative siRNA和NOX2 siRNA转染,随后培养基孵育24 h;NC+B组和NOX2 siRNA+B组分别采用negative siRNA和NOX2 siRNA转染,重新铺板,用终浓度1.5 mmol/L的布比卡因孵育3 h,更换培养基孵育至24 h。采用二氢乙锭荧光探针法检测细胞内ROS水平,采用TUNEL法确定细胞凋亡率,采用Western blot法检测活化的caspase-3和caspase-9的表达水平。
结果与NC组比较,NC+B组ROS水平、细胞凋亡率升高,活化的caspase-3和caspase-9表达上调,NOX2 siRNA+B组ROS水平升高,活化的caspase-3和caspase-9表达上调(P <0.05),细胞凋亡率差异无统计学意义,NOX2 siRNA组ROS水平、细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),活化的caspase-3和caspase-9表达上调(P<0.05)。与NC+B组比较,NOX2 siRNA+B组ROS水平、细胞凋亡率降低,活化的caspase-3和caspase-9表达下调(P<0.05)。
结论NOX2参与了布比卡因诱导神经细胞ROS大量合成的病理生理机制。
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