细粒棘球蚴EG19抗原基因的克隆表达及重组蛋白反应原性研究

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenchenyaya
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)中的原头蚴特异性抗原Eg19蛋白的反应原性,根据Gen Bank中Eg19抗原基因c DNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到p MD19-T载体,测序验证后,将Eg19抗原基因亚克隆至表达载体p ET-32a中,构建p ET-Eg19原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达的蛋白进行纯化及反应原性分析。结果 Eg19 c DNA全长534个核苷酸,编码177个氨基酸,等电点为4.54。该多肽含有2个N端酰基化位点,1个PKC磷酸化位点,1个CKⅡ磷酸化位点,1个ATP/GTP结合位点基序A(P-loop);抗原表位区集中在20~93、96~146位;为亲水性蛋白。SDS-PAGE可以检测到35 k Da的蛋白特异性条带;Western blot结果显示,表达的重组蛋白Eg19抗原能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用Eg19抗原蛋白作为Eg感染诊断中的候选抗原奠定了前期基础。
其他文献
本文主要简单的介绍了民法基本原则的相关内容,通过对民法基本原则在民事司法中的适用难点进行分析,来探讨民法基本原则在民事司法中的具体适用,以明确民法基本原则的必要性,充分
基层汉族干部在少数民族地区开展工作,相互之间的语言交流必不可少,如何快速、有效的学习掌握“双语”、提升“双语”交流水平对基层汉族干部开展工作便显得尤为重要。本文以新
期刊
期刊
期刊
期刊
“不东不西,不是东西”,这是过去山西在国家战略规划中,既没被划进西部也没有算成东部后无奈的自嘲。东部率先发展计划不包括山西;2000年西部大开发战略不包括山西;2004提出的“中
党员教育培训是党建工作的重要内容,对提高党员政治素养,提升党员工作能力,始终保持党员队伍先进性起着不可忽视的作用。为了保证教育培训的实效性,必须在实践中不断积累教育培训
期刊
排斥的反义词是吸引,两者间均在双方性质发生变异的情况下产生的质变,要么互相抵触,要么互相同化。在普遍性意义里的排斥带有相对的意味在里面,正负两极的正面意义程度上的相对立
期刊