研究微小RNA(miR)106a对甲状腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。
方法以人未分化甲状腺癌细胞株8505C和PTC细胞CGTH－W3为研究对象，利用慢病毒载体实现细胞内miR106a的过表达及抑制。采用实时荧光定量PCR(qRT－PCR)及Western blot法检测相关基因的表达，采用MTT法检测上述细胞的增殖活性变化，用流式细胞仪检测细胞凋亡。检测各组细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)－9活性，并采用划痕实验及Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭能力。组间数据比较采用两样本t检验、单因素方差分析。
结果MiR106a在8505C细胞中的表达高于CGTH－W3(t＝10.28，P<0.01)。成功构建并分别稳定转染miR106a抑制物基因、无义寡聚核苷酸基因、miR106a基因的细胞株8505C－miR106a(－)、8505C－control、CGTH－W3－miR106a(＋)、CGTH－W3－control。8505C细胞在抑制miR106a后，其增殖活性明显下降，8505C、8505C－control、8505C－miR106a(－)组间差异有统计学意义(F＝147.0，P<0.001)；凋亡比例明显升高，细胞中caspase－9活性明显升高，迁移和侵袭能力明显下降，3组间差异均有统计学意义(F＝537.8、804.3、19.2、100.3，均P<0.01)。CGTH－W3过表达miR106a后，其增殖活性明显升高，CGTH－W3、CGTH－W3－control、CGTH－W3－miR106a(＋)组间差异有统计学意义(F＝9.2，P<0.01)；凋亡比例下降，细胞中caspase－9活性下降，迁移和侵袭能力明显升高(F＝12.3、19.6、13.3、622.8，均P<0.01)。Western blot结果显示，8505C细胞在抑制miR106a后，MEKK2及p－ERK1/2表达明显下降，而CGTH－W3过表达miR106a后，MEKK2及p－ERK1/2表达明显升高。
结论MiR106a在甲状腺癌细胞中发挥着癌基因的作用，即可促进甲状腺癌细胞增殖，增加其侵袭及迁移能力并抑制凋亡。