目的 研究一种有效去除内毒素并保留菌体抗原蛋白的纯化方法,以期为口腔中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)蛋白菌苗研制提供参考.方法 利用辛基苯基聚氧乙烯醚(Triton X-114)处理饱和硫酸铵沉淀的细菌蛋白成分,经4、37、25 ℃等不同温度分别处理,重复处理步骤并将所获得的最终蛋白产物通过蛋白质印迹法、鲎实验和小鼠动物实验分别在体内和体外实验中检测菌体蛋白含量及内毒素去除水平.结果 利用Triton X-114萃取法处理Pi 3个循环后,蛋白质印迹法、鲎实验证明超过99.99％的细菌内毒素被剔除,同时超过90％的细菌主要蛋白成分得以保留；体外细胞刺激实验及小鼠动物实验均显示处理组产物刺激细胞因子的表达水平均显著低于未处理组(P＜0.05).结论 用Triton X-114萃取法去除内毒素的方法去除Pi内毒素效果得到验证,为其菌苗大规模制备工艺提供了技术选择。