论文部分内容阅读
目的
探究TNFα诱导蛋白3(A20蛋白)在人真皮成纤维细胞(Fb)向肌成纤维细胞(MFb)表型转化中的作用及机制。
方法通过酶消化法分离培养原代人正常皮肤Fb(NFb)和瘢痕皮肤Fb(HFb)，取对数生长期3～5代细胞进行试验，转化生长因子-β(TGF-β)刺激Fb模拟Fb向MFb转化过程，采用细胞转染敲除Fb中A20的表达，qRT-PCR、Western blot检测Fb中A20、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、p-Smad 2等变化。
结果与NFb相比，HFb中A20低表达(P<0.05)；TGF-β刺激Fb后，A20表达显著降低(P<0.05)，ColⅠ、Col Ⅲ及α-SMA等纤维化相关分子表达显著升高(P<0.05)，p-Smad 2表达显著升高(P<0.05)；敲除Fb中的A20，可进一步促进TGF-β诱导的ColⅠ、Col Ⅲ及α-SMA等纤维化相关分子及p-Smad 2表达的升高(P<0.05)。
结论A20蛋白参与了人真皮Fb向MFb表型转化的过程，并通过抑制Smad信号通路的活化，对TGF-β所介导的转化效应起负性调控作用。