【摘 要】
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目的 筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutrophil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为Hp疫苗的研制提供基础.方法 以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附-洗脱-扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,
【机 构】
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510515,广州,南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系,南方医科大学生物技术学院,广州大学化学化工学院食品科学系,510515,广州,南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系,51051
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目的 筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutrophil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为Hp疫苗的研制提供基础.方法 以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附-洗脱-扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.以制备的阳性噬菌体克隆短肽液免疫小鼠,免疫血清与NAP经Western blot分析,以验证NAP的模拟表位.结果 经3轮免疫筛选后挑选到45个阳性克隆,经ELISA鉴定有12个阳性克隆,测序结果显示5种表位,其中P17噬菌体展示肽FAHLATQ与NAP氨基酸序列(137～143)高度同源,位于NAP高抗原区域(118～140),免疫血清可识别NAP.结论 用噬菌体随机7肽库成功筛选到了NAP的模拟表位,为基于NAP的诊断和疫苗的研制提供了基础。
其他文献
1989年确认丙型肝炎病毒(HCV)为丙型肝炎病原体后,因其宿主范围仅限于黑猩猩和人,一直不能在常规培养细胞中复制,1999年Lohmann等[1]开发出HCV复制子技术,使HCV非结构区亚基因组RNA在Huh-7细胞中能够复制,成为研究HCV复制机制的有力工具。
为了解广州地区急性呼吸道患者中人偏肺病毒(hMPV)的感染情况,分析广州地区感染人群的流行病学特征及hMPV感染的临床特征,为hMPV的预防和治疗提供资料。
目的 研究结核分枝杆菌"北京家族"菌株鉴定的新方法——RD105缺失检测的可行性.方法 分别应用间隙寡核苷酸分型(Spoligotyping)和RD105缺失检测两种方法对结核分枝杆菌进行"北京家族"的鉴定,比较分析两种方法进行菌株鉴定结果的差异.结果 共对来自北京、福建、新疆和吉林的342株结核分枝杆菌临床分离菌株进行了鉴定,"北京家族"菌株261株,占76.32%.非"北京家族"菌株81株,占
机会性真菌感染是因机体免疫力下降引发的严重的播散性真菌感染.近30年来,随着继发性免疫功能低下(如肿瘤、烧伤、器官移植、AIDS等)人群的增多、广谱抗生素的大量使用、导管置管的广泛开展等,机会性真菌感染日益增多,且死亡率很高,据报道已经超过50%。
美国微生物学协会(AsM)主办的"感染性疾病的诊断和病原菌检测新锐技术国际会议"于2008年4月6-10日在北京召开,这是ASM首次在亚洲举行会议,大会由北京协和医院及中华微生物学和免疫学分会协办。
目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)458 nt～1308nt剪接特异性蛋白TSR'r'(源于HBVDNA聚合酶读码框,T代表TP区,S为Spacer区,R'为截短的RT区,r'为截短的RNaseH区)抗α-干扰素(IFN-α)作用并分析其功能区域.方法 PCR扩增获得HBV 458 nt～1308 nt剪接变异体剪接特异性基因TSR'r'及其缺失突变体,并克隆于pcDNA3.1/HisC.重组载体以
关于细菌名称中文译名的规范化问题作者曾发表过建议文章[1],目前我国学术界对细菌学名的中文译名仍存在不规范问题,如大肠埃希氏菌又称大肠埃希菌、沙门氏菌又称沙门菌等同一细菌名称在不同的学术杂志、参考书却有不同的中文译名。
中国免疫学会血液免疫分会组织，宁夏医学院科学协会、宁夏干部保健学会联合承办的“第九届全国红细胞免疫研讨会”和第二军医大学长海医院输血科主持的“首届现代系统免疫学实验研究体系研讨班”于2007年10月19日至22日在宁夏回族自治区银川市召开，代表来自北京、上海、江苏、山东、山西、江西、宁夏等省市，共28人。
双歧杆菌的完整肽聚糖(whole peptidoglycan, WPG)能激活巨噬细胞.目前认为WPG激活巨噬细胞的作用之一是提高其胞内游离ca2+离子([ca2+]i)的水平,但[Ca2+]i升高的途径仍不清楚.本文以激光共聚焦显微镜检测了WPG对巨噬细胞[Ca2+]i和pH以及膜电位的影响。
目的 对前期研究中所筛选出的能够与戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)重组衣壳蛋白颗粒P239存在特异性的相互作用的蛋白进行分析验证.方法 使用pull-down、MALDI-TOF-MS、免疫共沉淀技术及免疫荧光技术对与P239有潜在相互作用的蛋白进行鉴定和进一步分析.结果 MALDI-TOF-MS及免疫共沉淀技术,均表明该蛋白为热休克蛋白90(HSP90)并与P239相互