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目的
探讨炎症刺激对人脐带间充质干细胞生物学功能的影响及作用机制。
方法无菌条件下取正常足月剖腹产脐带血40～60 ml，以Ficoll-Hypaque液梯度离心分离细胞，常规培养24 h后分为C组、LPSL组、LPSM组、LPSH组，C组加入完全培养液，LPSL组、LPSM组、LPSH组分别加入含有12.5、25、50 μg/ml脂多糖(LPS)的等量培养液，观察不同浓度LPS孵育对脐带间充质干细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。
结果孵育24 h和48 h，LPSL、LPSM、LPSH组间充质干细胞增殖活性均高于C组(P<0.05)，且低剂量LPS诱导间充质干细胞的增殖能力最强(P<0.05)，48 h增殖活性高于24 h(P<0.05)。随着培养时间增加，四组NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐增加，LPSL、LPSM、LPSH组均高于C组(P<0.05)，且随着LPS浓度升高，NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。LPSL、LPSM、LPSH组碱性磷酸酶(ALP)活力和钙结节数量均高于C组，LPSM组ALP活力和钙结节数量高于LPSH组，LPSL组ALP活力和钙结节数量高于LPSM组和LPSH组，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论炎性反应可刺激人脐带间质干细胞增殖和成骨分化，低浓度的LPS可能是脐带间充质干细胞成骨分化的理想因子，在实际的临床疾病治疗中具有一定的意义和应用前景。