【摘 要】
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为提高烟叶转基因成分检测效率,建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系,通过优化该反应体系中的Mg2＋、d NTP、r Taq酶、引物浓度及退火温度等参数,实验最适条
【机 构】
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贵州省炯草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵州烟叶复烤有限责任公司铜仁复烤厂
【基金项目】
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贵州省科技支撑计划农业攻关[黔科合NY(2013)3020号]
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为提高烟叶转基因成分检测效率,建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系,通过优化该反应体系中的Mg2＋、d NTP、r Taq酶、引物浓度及退火温度等参数,实验最适条件为将4对相等摩尔浓度引物预先按1∶1∶1∶1（V/V）混合,在Mg2＋为1.5 mmol/L、d NTP为125μmol/L、r Taq酶1 U、混合引物1μmol/L,DNA 100 ng,退火温度65℃,循环数35个的反应条件下,在一次PCR反应中便可同时检测烟草内源基因NR,外源基因35S启动子、NOS终止子、NPT
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