【摘 要】
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目的在原核表达质粒pET21a-ha2成功构建的基础上,诱导目的基因在大肠杆菌中表达,进行表达产物的纯化及鉴定。方法原核表达质粒pET21a-ha2经PCR鉴定后,转入大肠杆菌Rosetta感
【机 构】
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遵义医科大学研究生院,贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室,贵阳市口腔医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(NO:81560186);贵州省科技厅计划项目(NO:黔科合基础SY字[2019]1333);遵义市科技计划项目(NO:遵义市科合HZ字[2019]21);贵州省科学技术项目(NO:黔科合J字LKZ[2012]15)
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目的在原核表达质粒pET21a-ha2成功构建的基础上,诱导目的基因在大肠杆菌中表达,进行表达产物的纯化及鉴定。方法原核表达质粒pET21a-ha2经PCR鉴定后,转入大肠杆菌Rosetta感受态细胞诱导筛选,经SDS-PAGE电泳检测,IPTG诱导表达。通过包涵体的变复性、Millipore超滤系统的滤浓缩、Ni-TA层析分离纯化HA2蛋白。结果原核表达质粒pET21a-ha2转化大肠杆菌经IPTG诱导后,成功表达HA2蛋白,大小约15 kD,与预计目的蛋白大小相同。HA2纯化蛋白浓度为0.449 mg
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