论文部分内容阅读
目的 分析Wnt10b基因在先天性巨结肠症(HD)中的表达,探讨其在HD发生中的意义.方法 收集2003年至2010年中国医科大学附属盛京医院经病理检查证实的散发性HD狭窄段和正常段组织标本各60例.采用HE染色和免疫组织化学染色方法检测标本中Wnt10b的表达情况;再用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)、Western blot从其基因和蛋白水平检测HD中Wnt10b的表达情况,并对其表达进行定量与比较分析.数据采用独立样本t检验.结果 经HE染色检测,60例患儿HD诊断明确,标本符合本研究要求.Wnt10b在HD狭窄段肠壁的肌间和黏膜下细胞胞质内呈强阳性反应,而在HD正常段肠壁的肌间和黏膜下细胞胞质内表达呈弱阳性或阴性;经免疫组织化学染色检测Wnt10b在HD狭窄段蛋白阳性面积百分率为0.061%±0.014%,正常段为0.006%±0.005%,两者比较,差异有统计学意义(t=2.955,P<0.05).经qRT-PCR检测,Wnt10b在HD狭窄段肠管中mRNA相对含量为23.5±1.6,高于正常段肠管中的13.1±1.7(t=1.687,P<0.05);60例患儿的HD狭窄段肠管组织标本中Wnt10b mRNA高表达者45例,低表达者15例.经Western blot检测,Wnt10b在HD狭窄段肠管中蛋白相对表达量为35.2±2.3,高于正常段肠管中的19.1±1.3(t =2.046,P<0.05);60例患儿的HD狭窄段肠管组织标本中Wnt10b蛋白高表达者43例,低表达者17例.结论 Wnt10b mRNA与蛋白在HD肠管组织中的异常表达,与HD的发生有密切关系,可能在先天性消化道畸形的肠道发育中起一定作用。