大鼠心肌细胞急性分离方法

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目的探讨酶法分离大鼠心肌细胞过程中的各种影响因素,提高细胞成活率和膜片钳实验成功率.方法采用Lan gendorff灌流,先用无钙液灌流7~8 min,再用含胶原酶P 0.1~0.3 g/L的酶液灌流8~1 0min,剪下心室肌组织,KB液中用吸管吹打分散,过150 μm筛网,放置6~7 h后进行膜片钳实验.结果在分离细胞过程中,注意控制水、酶、温度、pH、O2等各种影响因素,可得到横纹清晰、膜良好、长杆状的心肌细胞.结论仔细调整和控制细胞分离过程中的影响因素可以保证心肌细胞成活的数量和质量,有利于膜片钳
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