shRNA下调BAG-1表达降低肺癌A549细胞对顺铂的耐药性

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:starrydzf_01
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-1的细胞株(BAG-1-shRNA),阴性对照组使用无关序列质粒转染的细胞株(SC-shRNA),对照组使用未转染的亲本A549细胞株(Control)。Western blotting检测pGCsi-BAG-1转染对A549细胞BAG-1、Bcl-2表达的影响。MTT法、流式细胞术分别检测pGCsi-BAG-1转染对DDP处理后A549细胞的增殖和凋亡的影响。结果:成功构建稳定干扰BAG-1表达的A549细胞株,BAG-1-shRNA组细胞中BAG-1和Bcl-2蛋白表达显著低于SC-shRNA组和对照组(均P<0.05)。随DDP(2.5~40μg/ml)浓度增加,各组细胞增殖抑制率也随之升高,DDP浓度为2.5μg/ml时,BAG-1-shRNA组A549细胞的增殖抑制率即显著高于SC-shRNA组和对照组[(22.26±4.89)%vs(10.07±3.82)%,(8.12±4.09)%,均P<0.05]。与SC-shRNA组和对照组相比,DDP(2.5μg/ml)处理24 h后,BAG-1-shRNA组凋亡率显著升高[(37.8 4±3.62)%vs(16.80±2.81)%、(17.10±3.11)%,P<0.05]。结论:下调BAG-1表达可抑制DDP作用下的A549细胞的增殖并促进其凋亡。 OBJECTIVE: To investigate the effect of Bcl-2 associated athanogene-1 (BAG-1) on the drug resistance of cisplatin (DDP) in lung cancer A549 cells by vector-mediated shRNA knockdown. Methods: shRNA targeting vector BAG-1 was constructed and transfected into A549 cells. In the experimental group, the cell line stably transfected with pGCsi-BAG-1 (BAG-1-shRNA) was used, the negative control group was transfected with the SC-shRNA without any relevant sequence, and the untransfected parental A549 cells Control. The effect of pGCsi-BAG-1 transfection on the expression of BAG-1 and Bcl-2 in A549 cells was detected by Western blotting. MTT assay and flow cytometry were used to detect the effect of pGCsi-BAG-1 transfection on the proliferation and apoptosis of A549 cells after DDP treatment. Results: The BAG-1 and Bcl-2 protein expression in BAG-1-shRNA group was significantly lower than that in SC-shRNA group and control group (all P <0.05). With the increase of DDP concentration (2.5 ~ 40μg / ml), the proliferation inhibition rate of each group also increased. When the DDP concentration was 2.5μg / ml, the proliferation inhibition rate of A549 cells in BAG-1-shRNA group was significantly higher than that in SC -shRNA group and control group [(22.26 ± 4.89)% vs (10.07 ± 3.82)%, (8.12 ± 4.09)%, all P <0.05]. Compared with SC-shRNA group and control group, the apoptosis rate of BAG-1-shRNA group was significantly increased after treated with DDP (2.5μg / ml) for 24 h [(37.8 4 ± 3.62)% vs (16.80 ± 2.81)% , (17.10 ± 3.11)%, P <0.05]. Conclusion: Down-regulation of BAG-1 can inhibit the proliferation of A549 cells induced by DDP and promote its apoptosis.
其他文献
文中开发研究了一种可应用在高温空气燃烧技术(HTAC)领域的新型蓄热器--档位蓄热器,并对其基本原理、具体设计、实验系统及应用前景进行了详细介绍.
中国楼市走出了一个个十字路口,随即又走进了一个个迷局。  是任由泡沫进一步吹大,以致无可避免地走向崩盘,还是慢慢挤压泡沫,让房地产市场走向健康平稳的发展道路?是兼顾推动经济与改善民生,还是放任楼市成为加速贫富分化的逐利场?政府显然正在做着艰难的选择。  时局如弈。股市如车,楼市如马,期市如炮,都不过是发展大局中的棋子。  好马可奔腾驰骋,腾挪万里,楼市对拉动投资和带动内需作用至关重要。但烈马难骑,
系统介绍了重油、煤焦油、混合油三种不同油质在轧钢加热炉上的应用状况,通过分析对比,各相关企业可以从中找出一条适合自身发展的节能途径.
5月12日14时28分,四川汶川发生里氏8.0级强烈地震,灾情十分危急。成都军区联勤部卫生部坚决贯彻党中央、国务院、中央军委和胡主席的重要指示,坚决执行军区抗震救灾联合指挥部的
介绍了蓄热式钢包烘烤器在天铁的应用情况.通过与常规烘烤器烘烤效果的比较,充分说明了蓄热式烘烤器在烘烤时间、烘烤效果以及节能降耗等方面具备的显著优越性.
本文从优化工艺、节能降耗的角度出发,提出了连轧加热炉工艺在操作中存在的问题,从理论上进行了分析和讨论,并提出了优化工艺参数、完善工艺制度的解决办法.此外,本文也列举
能源利用率低下、能源供应的紧张和环境问题,推动着能源技术发展.本文就节能及几种清洁新能源的发展作了展开.
本文论述了将高温空气燃烧技术应用于燃气辐射管燃烧器加热装置,设计研制出W型和U型蓄热式(HTAC)燃气辐射管燃烧器并经不断实验改进推出定型产品.分析和介绍了新型(HTAC)燃气
会议
介绍宣钢近三年来通过调整产品结构、采用先进技术、开展系统节能、加强余热利用等节能措施,实现了节能工作的重大进展,为宣钢的可持续发展奠定了基础.
本文重点阐述了包钢"十五"前期节能技术进步,分析了与钢铁联合企业存在差距和潜力,指明了节能的发展方向及有效途径.