探讨黄芪多糖对钙离子载体A23187快速诱导树突状细胞(DC)免疫活性的影响。
方法2014年9月20日,无菌条件下分别于9例健康男性志愿者肘静脉采集血液10~20 mL,作为实验材料。志愿者纳入标准:采血当天无发热、无感染,无肝炎、结核等传染病接触史。采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),取生长状态良好的PBMC(浓度为1.0×106/mL),以1 mL/孔接种于24孔平底培养板。选择9个培养孔,按简单随机法将其分为3组,分别加入不同的诱导剂。A23187+黄芪多糖组(n=3):先加入A23187,再加入黄芪多糖;A23187组(n=3):仅加入A23187;对照组(n=3):不加诱导剂。3组细胞均于37 ℃、5%CO2及饱和湿度培养箱中培养48 h后,比较各组细胞形态学、免疫表型及刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力的差异。
结果体外培养48 h后,A23187组部分PMBC出现树状突起,DC特异性抗原CD83、CD80、CD86分子表达阳性率分别为(28.9±6.2)%、(42.1±5.6)%及(49.1±7.8)%;A23187+黄芪多糖组的绝大部分PMBC出现明显树突状突起、且免疫表型及刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力均较A23187组PBMC增强。A23187+黄芪多糖组细胞表面DC特异性抗原CD83、CD80、CD86分子表达阳性率分别为(43.6±8.2)%、(69.9±19.7)%及(79.4±22.5)%,与A23187组及对照组比较,差异均有统计学意义(t=-65.23、-144.86、-81.28,P<0.05;t=-25.50,-82.36,-45.21;P<0.05)。在1∶1 280、1∶320、1∶80、1∶20、1∶5的不同刺激细胞(SC)与效应细胞(EC)比例下,A23187+黄芪多糖组DC细胞刺激指数(SI)分别为1.38±0.39、3.91±0.94、7.91±1.48、10.38±2.46、11.7±2.83。与A223187组及对照组相比,差异有统计学意义(t=-32.45、-65.96、-45.32、-37.89、-64.25,P<0.05;t=-5.66,-13.08,-29.92,-10.99,-10.51,P<0.05)。
结论黄芪多糖在A23187快速诱导PBMC分化为DC的过程中起促进作用,表明黄芪多糖参与A23187快速诱导PBMC分化为DC的过程。中药黄芪的免疫调节功能可能是通过黄芪多糖发挥作用。