【摘 要】
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根据普氏立克次体弱毒株—E株14kD表面蛋白基因的DNA序列设计合成了一对寡核苷酸引物，二引物的5′端分别加上了限制性内切酶EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切位点。采用此引物对成功地扩增了普氏立克次体强毒株——Breinl株（国际标准株）的14kD表面蛋白基因，基因的分子大小为0.72kb。扩增获得的基因DNA经限制性内切酶Hind Ⅲ和EcoRⅠ酶切后与经相同酶切的质粒载体pUC19连接，转化受体大肠
【机 构】
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中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所 北京 102206（现工作单位：北京地坛医院 100011）,中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所 北京 102206
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根据普氏立克次体弱毒株—E株14kD表面蛋白基因的DNA序列设计合成了一对寡核苷酸引物，二引物的5′端分别加上了限制性内切酶EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切位点。采用此引物对成功地扩增了普氏立克次体强毒株——Breinl株（国际标准株）的14kD表面蛋白基因，基因的分子大小为0.72kb。扩增获得的基因DNA经限制性内切酶Hind Ⅲ和EcoRⅠ酶切后与经相同酶切的质粒载体pUC19连接，转化受体大肠杆菌工程菌JM103，经酶切和DNA斑点杂交鉴定，成功地克隆了扩增的普氏立克次体强毒株（Breinl株）的14kD表面蛋白基因。
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