miR-498靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1对口腔鳞状细胞癌细胞生长的影响

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目的 探讨miR-498靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞生长的影响。方法 q RT-PCR检测150例OSCC患者肿瘤组织及OSCC细胞系HSC-3、SCC-15、SCC-9中miR-498表达;将miR-498 mimics和anti-miR-498分别转染于SCC-15细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-498水平,western blot检测细胞中PCK1蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;双荧光素酶报告基因检测miR-498与PCK1的靶向关系;共转染miR-498和PCK1进一步验证miR-498和PCK1对SCC-15细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。结果 与人正常口腔角质细胞HOK(1.03±0.14)比较,人OSCC细胞系HSC-3(2.05±0.21)、SCC-15(2.75±0.31)、SCC-9(2.31±0.28)中miR-498的表达水平显著升高(F=53.639,P <0.001),且SCC-15细胞中miR-498的表达量最高,因此,选择SCC-15细胞进行后续研究。与对照组和miR-NC组比较,miR-498 mimics组SCC-15细胞迁移与侵袭数目显著升高(P <0.05),细胞凋亡率显著降低(P <0.05);与对照组和anti-miR-NC组比较,anti-miR-498组SCC-15细胞迁移与侵袭数目显著降低,细胞凋亡率显著升高(P <0.05)。miR-498 mimics组(0.23±0.02)SCC-15细胞中PCK1蛋白表达水平显著低于对照组(0.51±0.08)和miR-NC组(0.49±0.06,P <0.05);anti-miR-498组(1.03±0.05)SCC-15细胞中PCK1蛋白表达水平显著高于对照组(0.51±0.08)和anti-miR-NC组(0.48±0.07,P <0.05)。miR-498靶向负调控PCK1表达,上调PCK1表达可逆转过表达miR-498对SCC-15细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结论 miR-498通过靶向抑制PCK1表达促进SCC-15细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,可能为OSCC的临床诊治提供新的分子靶标。
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