【摘 要】
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目的:检测骨碎补有效成分柚皮苷对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法:以成骨细胞株MC3T3-E1细胞为体外药效的试验模型(药物组和对照组),通过CCK-8法观察10
【机 构】
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浙江大学医学院附属第二医院口腔科,杭州口腔医院,
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目的:检测骨碎补有效成分柚皮苷对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法:以成骨细胞株MC3T3-E1细胞为体外药效的试验模型(药物组和对照组),通过CCK-8法观察10,1,0.1,0.01,0.001,0.000 1μmol.L-1的柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响;通过乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验观察以上浓度的柚皮苷溶液对细胞毒性能力的影响。通过骨形成蛋白-2(BMP-2),碱性磷酸酶(ALP)活性测定和骨钙素(OC)含量测定观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞分化能力的影响;通过Von kossa钙化染色法观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响。结果:高浓度的柚皮苷溶液在12 h和24 h时能促进MC3T3-E1细胞的增殖作用。而低浓度的柚皮苷溶液则无此作用。所测的各个组别细胞毒性百分比都较小,且随着时间的推移(12,24,48 h)变化较小。光镜下观察各个时间点细胞的密度和形态也未发生明显的变化。BMP-2细胞免疫化学结果表明,24,48 h时柚皮苷浓度10,1,0.1μmol.L-1包浆内棕色着色比对照组明显。ALP检测结果表明48 h时,1,0.1μmol.L-1的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05)。72 h时,0.1μmol.L-1的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05)。OC检测结果表明12 d时,10,1μmol.L-1柚皮苷溶液作用组与对照组相比OC活性明显提高(P<0.05)。Vonkossa染色钙化面积百分比结果表明3组柚皮苷溶液作用组与对照组相比无明显区别。结论:柚皮苷溶液可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖能力和分化能力。
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