【摘 要】
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目的 观察骨肉瘤组织中miR-370-3p、FOXM1 mRNA的表达，观察miR-370-3p和FOXM1 mRNA对人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响，并验证其靶向关系机制。方法 （1）观察骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p及及其下游靶基因叉头框蛋白M1（FOXM1）mRNA表达：37例骨肉瘤患者，均行肿瘤切除术，术中保存骨肉瘤及癌旁组织，采用实时定量PCR法检测骨肉瘤及癌旁组织
【基金项目】
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山东省自然科学基金面上项目（ZR2020MH200）；
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目的 观察骨肉瘤组织中miR-370-3p、FOXM1 mRNA的表达，观察miR-370-3p和FOXM1 mRNA对人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响，并验证其靶向关系机制。方法 （1）观察骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p及及其下游靶基因叉头框蛋白M1（FOXM1）mRNA表达：37例骨肉瘤患者，均行肿瘤切除术，术中保存骨肉瘤及癌旁组织，采用实时定量PCR法检测骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p、FOXM1 mRNA，分析骨肉瘤组织FOXM1 mRNA表达与miR-370-3p表达的相关性。采用Kaplan-Meier曲线、Log-Rank检验分析miR-370-3p表达与骨肉瘤患者临床病理参数及预后关系。（2）观察miR-370-3p过表达及FOXM1抑制表达的人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响：取MG63细胞分为1～4组，分别转染miR-370-3p mimic（促进miR-370-3p表达）、mimic NC（空载体质粒）、空白对照组及FOXM1 siRNA干扰质粒（FOXM1基因敲除质粒）。分别于转染0、24、48、72、96 h采用CCK-8法观察各组细胞增殖情况，采用划痕实验观察各组细胞迁移情况，采用Transwell小室观察各组细胞侵袭能力。（3）预测MG63细miR-370-3p与FOXM1靶向关系构建pmirGLO-FOXM1-野生型/突变型质粒，将MG63细胞分为A、B、C、D组，分别用1μL pmirGLO-FOXM1-WT+200 nmol miR-370-3p mimic、1μL pmirGLO-FOXM1-WT+mimic NC、1μL pmirGLOFOXM1-MUT+200 nmol miR-370-3p mimic、1μL pmirGLO-FOXM1-MUT+200 nmol mimic NC转染。转染24 h时采用双荧光素酶报告检测系统观察各组细胞荧光活性。结果 （1）与癌旁组织比较，骨肉瘤组织miR-370-3p相对表达量低、FOXM1 mRNA相对表达量高（t=4.66,3.41;P均<0.05）。随miR-370-3p表达量升高，骨肉瘤组织FOXM1 mRNA表达量呈下降趋势（R2=0.6481,P=0.1284）。miR-370-3p表达与骨肉瘤患者临床分期、远端转移情况有关（χ~2=4.430、6.027;P均<0.05）。miR-370-3p低表达的骨肉瘤患者预后比miR-370-3p高表达患者差（P<0.05）。（2）2、3组相比，转染48、72、96 h时1、4组细胞OD450值均降低（P均<0.05）。与2、3组相比，转染24 h时1、4组划痕愈合率低、穿膜细胞数少（P均<0.05）。（3）与B组比较，A组细胞荧光活性降低（P0.05）。结论 骨肉瘤组织中miR-370-3p表达降低、FOXM1 mRNA表达升高。促进miR-370-3p表达及FOXM1抑制表达的MG63细胞增殖、侵袭及迁移能力均降低。骨肉瘤细胞中miR-370-3p可能通过靶向调控FOXM1表达来抑制MG63的增殖、迁移及侵袭。
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