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目的改良人骨髓问充质干细胞（hBM—MSCs）分离方法，提高细胞定向分化能力。方法用密度梯度离心法从少量人骨髓中分离得到单个核细胞，贴壁培养3天后换液，实验组换液后72h内每隔12h更换新鲜培养液，传代时胰蛋白酶37℃作用2min后终止消化；对照组未经频繁换液，胰蛋白酶消化3min。镜下观察分离细胞的形态变化。用成骨、脂肪和软骨细胞诱导液诱导两组第3代（P3）细胞分化，碱性磷酸酶钙钴染色法、茜素红染色法和VonKossa银染色法检测成骨细胞分化；油红O染色法检测脂肪细胞分化；阿尔新蓝染色法检测软骨细胞分化