【摘 要】
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目的 建立简便的胎鼠海马神经细胞无血清原代培养及纯化方法,为体外研究神经细胞相关模型做准备.方法 取E18-19 d的SD孕鼠,分离出胎鼠海马,经机械吹打及0.125％胰酶消化后,台盼
【机 构】
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641000,四川省内江市第一人民医院神经内科;西南医科大学附属医院神经内科, 四川省泸州市,646000
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目的 建立简便的胎鼠海马神经细胞无血清原代培养及纯化方法,为体外研究神经细胞相关模型做准备.方法 取E18-19 d的SD孕鼠,分离出胎鼠海马,经机械吹打及0.125％胰酶消化后,台盼蓝计数,DMEM/F12+10％FBS接种于PDL包被的盖玻片上,第2天全量更换为Neurobasal Medium+2％B27,此后每3天1/3～1/2换液,每2天MTT测细胞相对生长率,第8天的细胞用β-ⅢTublin染色做神经细胞鉴定.结果 胎鼠海马组织经过0.125％胰酶消化后,台盼蓝计数,可得到92％以上的活细胞.神经细胞体外生长良好.MTT结果显示,培养7～8 d的神经细胞长势最好,细胞核立体感强,轴突联接成网络,可以做神经细胞鉴定.结论 此方法培养胎鼠海马神经细胞可以获得长势良好、细胞形态基本一致的、细胞纯度较高的神经细胞,可以作为体外研究神经细胞的良好模型.
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