脲和盐酸胍诱导溶菌酶去折叠的荧光相图法研究

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用荧光相图法分别研究了脲和盐酸胍诱导卵清溶菌酶去折叠的过程.当变性体系中无还原剂2-巯基乙醇存在、脲浓度从0变化至4.0 mol/L(或盐酸胍浓度从0变化至3.0 mol/L)时,溶菌酶从天然态转变为部分折叠中间态,当脲浓度从4.0mol/L变化至8.0 mol/L(或盐酸胍浓度从3.0 mol/L变化至6.0 mol/L)时,溶菌酶从中间态转变为去折叠态,此时该蛋白的变性过程符合"三态模型".而当变性体系中有该还原剂存在时,溶菌酶则由天然态直接转变为去折叠态,此时脲诱导该蛋白去折叠的过程符合典型的"二态模型".实验结果表明荧光相图法可以检测蛋白质去折叠的中间态.
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