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根据羊口疮病毒（ORFV）H2L基因序列,设计合成1对引物,通过确定最佳的PCR反应条件,建立了检测羊口疮病毒DNA的PCR检测方法。结果显示,用这1对引物均能扩增出羊口疮病毒507 bp的特异性片段,同时检测口蹄疫病毒和山羊痘病毒,结果均为阴性,最小检出量为5 pg。该方法具有良好的特异性和敏感性,可对临床组织病料中的ORFV进行快速检测。