【摘 要】
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目的 观察丙戊酸钠(VPA)对胃癌细胞系BGC-823的生长抑制及诱导凋亡作用,并通过检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase 3、caspase 8、caspase 9)的活性和蛋白表达变化探讨VPA诱导凋亡的可能机制.方法 MTT法检测细胞生长抑制、Annexin V/PI双染检测细胞凋亡、间接免疫荧光法分析caspase 3、caspase 8、caspase 9蛋白变化,分光光度法检测c
【机 构】
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250014,济南,山东省千佛山医院普通外科中心实验室,250014,济南,山东省千佛山医院,检验科,250014,济南,山东省千佛山医院普通外科中心实验室,250014,济南,山东省千佛山医院普通外
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目的 观察丙戊酸钠(VPA)对胃癌细胞系BGC-823的生长抑制及诱导凋亡作用,并通过检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase 3、caspase 8、caspase 9)的活性和蛋白表达变化探讨VPA诱导凋亡的可能机制.方法 MTT法检测细胞生长抑制、Annexin V/PI双染检测细胞凋亡、间接免疫荧光法分析caspase 3、caspase 8、caspase 9蛋白变化,分光光度法检测caspase 3、caspase 8、caspase 9活性改变.结果 VPA 0.75~4.00 mmol/L干预BGC-823细胞24 h和48 h后,细胞生长被明显抑制,细胞凋亡率显著增加[VPA 0.75 mmol/L,24 h时细胞凋亡率为(7.2±0.5)%,48 h时为(9.2±1.0)%;VPA 4.00 mmol/L,24 h时为(16.7±2.2)%,48 h时为(20.4±1.6)%],与对照组[24 h时细胞凋亡率为(4.9±0.2)%,48 h时为(5.1±0.8)%]比较,差异有统计学意义(P<0.001),并呈时间、剂量依赖趋势;caspase 3、caspase 9蛋白表达被明显上调,活性升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001).caspase 8活性及蛋白表达在VPA作用24 h后未见明显改变,48 h后仅轻度增加.结论 VPA可明显抑制胃癌细胞的生长并诱导其凋亡,而且该作用主要通过激活caspase 9介导的内源性凋亡途径实现:caspase 8介导的外源性细胞凋亡途径未参与或仅部分参与了该诱导过程。
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