Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)核心蛋白基因片段的克隆与表达

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:han8349
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

HIV核心蛋白抗体是抗HIV免疫反应发生的标志,也是诊断和判断预后的指标。用PCR方法体外扩增了HIV-1核心蛋白基因的一个片段(编码核心蛋白207位至331位残基),并克隆入大肠杆菌表达载体pEx31中,表达产物占菌体总蛋白的30%左右。经初步纯化可使之达85%的纯度。ELISA实验证实表达的重组核心蛋白能与AIDS患者阳性血清中的抗体发生特异识别反应。

其他文献
本研究检测6株抗肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)单克隆抗体(单抗),发现其中3株单抗能够中和TNF对L929细胞的细胞毒性,但它们的表位特异性却不甚相同。而在结合部位测定实验中,中和性单抗(1B2,5A7)与非中和性单抗(1G9,5B5)均不能阻断TNF与L929细胞的结合。这些结果提示TNF分子上可能有多个部位与其细胞毒性相关,而且TNF分子的L929细胞(受体
从19种植物中药中分离了21种多糖,分别与有丝分裂原一起刺激淋巴细胞,以3H-TdR参人为指标,发现与PHA、ConA、PWM和LPS有加和作用的多糖,依次为4种,9种,8种和3种,其中2种多糖与PHA,4种与PWM有协同作用。加和作用出现的前提,是复合效应大于多糖自身的直接效应,因此多糖的致有丝分裂作用,是其影响有丝分裂原反应的重要途径。
期刊
本研究利用中药雷公藤、黄芪对自发性免疫疾病的动物模型MRL/1pr小鼠进行了治疗,检测了小鼠1pr异常细胞阳性率的变化,并观察了小鼠脾细胞培养上清中IL-2、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF)的变化,结果发现,中药雷公藤可明显抑制MRL/1pr小鼠1pr细胞的增殖,并可以降低脾细胞培养上清中TNF的活性,提示雷公藤可作为一种免疫抑制剂对MRL/1pr小鼠进行治疗。一般认为MRL/1pr小鼠产生IL-
应用基因重组技术,将人肿瘤坏死因子α(hTNFα)cDNA去前导序列并修饰后,克隆到表达载体pBV220的PRPL启动子下游,并转化到DH5α菌后,经发酵培养,温度调控,获高效表达。用L929细胞毒性测定法,每ml菌液TNFα表达量为2×105单位。SDS-PAGE扫描,TNFα占菌体可溶性蛋白的30%左右。表达的TNFα分子量约为17kD。并对细菌表达动力学进行了研究。
Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的外膜蛋白gp120在病毒感染致病过程中起关键作用。重组gp120产物可作为艾滋病的诊断工具,还可能成为抗HIV的亚单位疫苗。我们将编码gp120氨基端和羧基端的两个基因片段分别克隆入大肠杆菌表达载体pEX31中,使重组gp120的表达水平占菌体总蛋白的30%左右。应用分离包涵体的方法初步纯化了表达产物,纯度可达70%以上。Western blot结果说明艾滋病患
期刊
本文报道应用逆转录病毒载体介导人IL-2受体基因转染哺乳动物细胞获得表达。经电穿孔法将含有人IL-2受体基因的逆转录病毒载体NTK-12转染Amphotropic和Ecotropic病毒包装细胞系,继之用病毒收获液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,经间接免疫荧光及APAAP桥联酶标免疫组化染色表明人IL-2受体基因在小鼠细胞获得稳定表达。为进一步研究IL-2受体基因的分子结构和功能及鉴定、筛选抗IL
中华眼镜蛇毒(Chinese Cobra venom,Naja naja atra venom)中的蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF)能大量耗竭豚鼠补体,其去补体作用可延续12~16天。用羊红细胞(SRBC)免疫用CVF去补体的豚鼠,其初次体液免疫反应可受到非常显著的抑制。
采用外周血淋巴细胞(PBMC)共培养方法,首次从一名中国艾滋病患者(AIDS)血液标本中分离出一株人免疫缺陷病毒(HIV)。此株病毒可在人PBMC及人淋巴细胞系MT4和C8166培养中引起合胞形成,培养上清中的病毒滴度可达2×105TCID50/ml以上。H9, Raji和Jurkat细胞对此分离株不敏感,未见细胞病变。通过中和试验、间接酶标抗体染色、电镜观察、蛋白印迹试验和多聚酶链式反应,初步把