目的 探讨磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路在植物雌激素染料木素(genistein)促进内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性过程中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,100 mg/L)以及ox-LDL( 100 mg/L)加genistein( 100nmoL/L)分别作用5、10、15、30和60 min的基础上,Greiss反应测定细胞培养上清中一氧化氮(N0)的含量,RT-PCR检测HUVEC eNOS mRNA的表达,Western blot检测HUVEC eNOS蛋白和磷酸化eNOS (Ser1179)的表达水平.Western blot检测PI3K/AKT抑制剂LY294002和NSC154020干预后,genistein 对HUVEC磷酸化eNOS( Ser1179)表达的影响.结果 HUVEC经100 nmol/L genistein(5、10、15、30和60 min)处理后,培养液NO浓度和磷酸化eNOS(Ser1179)表达水平均明显高于ox-LDL组(P均＜0.05),其中genistein 15 min处理组最高,然而eNOS mRNA和非磷酸化eNOS蛋白表达水平与ox-LDL 组比较差异无统计学意义(P＞0.05).HUVEC经PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002和NSC154020干预后磷酸化eNOS( Ser1179)表达明显低于genistein 15 min处理组(P＜0.05).结论 genistein对HUVEC NO的诱导作用与其促进eNOS(Ser1175)磷酸化进而提高eNOS活性密切相关,而genistein对磷酸化eNOS( Ser1179)的诱导作用被PI3K/AKT抑制剂LY294002和NSC154020阻断,可见genistein在促进eNOS活性过程中通过PI3K/AKT信号通路发挥重要作用。
磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在植物雌激素染料木素促进eNOS活性过程中作用的实验研究
【摘 要】
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目的 探讨磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路在植物雌激素染料木素(genistein)促进内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性过程中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,100 mg/L)以及ox-LDL( 100 mg/L)加genistein( 100nmoL/L)分别作用5、10、15、30和60 min的基础上,Grei
【机 构】
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030001太原,山西医科大学基础医学院省部共建教育部重点实验室,030001太原,山西医科大学基础医学院省部共建教育部重点实验室,030001太原,山西医科大学基础医学院省部共建教育部重点实验室
【发表日期】
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2012年40期
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