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目的
观察自噬相关基因、蛋白在急性期脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌组织中的表达。
方法选取24只雄性Wistar大鼠并随机分为模型组(12只)及对照组(12只)。模型组采用改良Allen′s法建立脊髓损伤模型，对照组仅予以椎板切除处理。于术后6 h对2组大鼠进行BBB运动评分，采用尼氏染色观察2组大鼠脊髓形态学变化，采用Western blotting和免疫荧光染色法检测膀胱平滑肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)及P62表达，采用RT-PCR检测膀胱平滑肌自噬相关基因LC3、P62、Beclin1 mRNA表达。
结果模型组大鼠下肢运动功能BBB评分较对照组明显降低(P<0.05)。尼氏染色观察可见模型组神经元及尼氏小体数量减少；Western blotting染色提示模型组LC3-Ⅱ表达较对照组增高(P<0.05)，P62表达较对照组降低(P<0.05)。免疫荧光染色法提示模型组膀胱平滑肌LC3阳性细胞率较对照组增高(P<0.05)，P62阳性细胞率较对照组降低(P<0.05)。RT-PCR检测发现模型组LC3及Beclin1 mRNA水平较对照组升高(P<0.05)，P62 mRNA水平较对照组降低(P<0.05)。
结论自噬在急性脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌中表达活跃，可能与脊髓损伤后神经源性膀胱发病机制有关。