【摘 要】
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目的 研究布托啡诺对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响以及潜在机制。方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,CCK-8法检测不同浓度布托啡诺对MDA-MB-231细胞存活率影响;根据实验要求分为对照组、布托啡诺组、布托啡诺+pcDNA3.1组、布托啡诺+pcDNA3.1-JAG1组;EDU法检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞迁移与侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;平板克隆形成实验检测
【基金项目】
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河北省卫生健康委员会2020年度拟立项科学研究课题计划项目(20200307);
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目的 研究布托啡诺对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响以及潜在机制。方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,CCK-8法检测不同浓度布托啡诺对MDA-MB-231细胞存活率影响;根据实验要求分为对照组、布托啡诺组、布托啡诺+pcDNA3.1组、布托啡诺+pcDNA3.1-JAG1组;EDU法检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞迁移与侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力;RT-qPCR检测JAG1、Notch1 mRNA水平;Western blot检测JAG1、Notch1、Ki67、MMP2、cleaved-Caspase3蛋白水平。结果 选取10μmol/L布托啡诺处理细胞进行后续实验;与对照组相比,布托啡诺组MDA-MB-231细胞EDU阳性细胞率、迁移数量、侵袭数量、克隆集落数、JAG1、Notch1mRNA水平、JAG1、Notch1、Ki67、MMP2蛋白水平显著性降低,凋亡率、cleaved-Caspase3蛋白水平显著性升高(P<0.05)。与布托啡诺+pcDNA3.1组相比,布托啡诺+pcDNA3.1-JAG1组MDA-MB-231细胞EDU阳性细胞率、迁移数量、侵袭数量、克隆集落数、JAG1、Notch1mRNA水平、JAG1、Notch1、Ki67、MMP2蛋白水平显著性升高,凋亡率、cleaved-Caspase3蛋白水平显著性降低(P<0.05)。结论 布托啡诺可能通过抑制JAG1/Notch信号通路抑制MDA-MB-231细胞恶性生物学行为。
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