探讨甾醇类药NSC67657诱导急性早幼粒细胞白血病HL－60细胞单核系分化时β连环蛋白(β－catenin)和T细胞因子4(TCF－4)抑制蛋白(ICAT)和Wnt信号通路相关mRNA和蛋白的表达。
方法10 μmol/L NSC67657药物处理HL－60细胞5 d后，采用瑞氏染色、非特异酯酶染色分析细胞的分化方向，采用流式细胞术分析细胞的分化程度和细胞周期的分布情况，采用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测Wnt信号通路相关因子ICAT、β－catenin、TCF－4、Wnt信号通路下游靶点c－myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、TCF－1 mRNA和蛋白在细胞分化前后的表达情况。
结果NSC67657可诱导HL－60细胞向单核系分化。10 μmol/L NSC67657作用5 d后，处理组CD14＋细胞数为(94.37±2.84)%，高于未处理组[(1.31±0.09)%]，差异有统计学意义(P<0.01)。处理组G1/G0期细胞所占比例为(76.46±2.83)%，高于未处理组[(59.40±5.42)%]，差异有统计学意义(P<0.05)；处理组S期细胞所占比例为(18.76±0.98)%，低于未处理组[(34.38±2.61)%]，差异有统计学意义(P<0.05)。药物作用后HL－60细胞中ICAT mRNA和蛋白的表达水平上调(均P<0.01)，β－catenin mRNA和蛋白的表达水平下调(均P<0.01)，细胞核中β－catenin蛋白的表达水平下调(P<0.01)。处理组和未处理组HL－60细胞中TCF－4 mRNA、总蛋白和细胞核蛋白的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。药物诱导HL－60细胞分化后，Wnt信号通路下游靶基因c－myc、cyclin D1、TCF－1 mRNA和蛋白的表达水平均下调(均P<0.05)。
结论NSC67657可诱导HL－60细胞向单核系分化，导致Wnt信号通路关键调节因子β－catenin及下游靶点的表达下调，Wnt信号通路可能直接或间接地参与了HL－60细胞的单核系分化进程。