【摘 要】
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目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠心房肌细胞内钙调控的急性调节作用及其潜在分子机制.方法 利用双酶促消化法分离野生型小鼠的心房肌细胞,分别浸润在0.05 ng/ml TNF-
【机 构】
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首都医科大学附属北京安贞医院心内科,北京,100029
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目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠心房肌细胞内钙调控的急性调节作用及其潜在分子机制.方法 利用双酶促消化法分离野生型小鼠的心房肌细胞,分别浸润在0.05 ng/ml TNF-α 溶液(TNF-α 组)及正常台式液(对照组)中120 min,运用IonOptix系统及共聚焦显微镜测量心房细胞内钙释放及钙火花相关参数,以及两组心房细胞内线粒体活性氧簇(ROS)的变化趋势.结果 与对照组相比,TNF-α 组心房细胞内钙释放幅值降低[(3.67±0.19)F/F0 vs(4.87±0.31)F/F0,P<0.05],钙离子流衰减时间延长[(310.26±10.14)ms vs(223.70±8.14)ms,P0.05].此外,TNF-α 组肌浆网钙含量较对照组有所降低[(8.05±0.59)F/F0 vs(9.45±0.67)F/F0,P<0.05].同时,TNF-α 组心房细胞内钙火花的发生频率大幅增加[(4.32±0.19)s-1 vs(2.60±0.16)s-1,P<0.05],时程延长[(32.78±1.3)ms vs(27.80±0.93)ms,P<0.05],钙火花幅值降低[(1.07±0.26)F/F0 vs(1.26±0.06)F/F0,P<0.05];而钙火花宽度和达峰时间虽有改变,但与对照组相比无统计学差异.与对照组比较,TNF-α 组心房细胞内线粒体ROS的生成快速增加了约2.26倍.结论 TNF-α 通过线粒体ROS途径快速增加了小鼠心房细胞内自发性钙释放活动,提升了致心律失常性触发活动的可能.
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