TNF-α3′-UTR双荧光素酶报告基因系统的构建及丹参酮类药物筛选

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：forbook121

【摘要】

：

目的：构建并鉴定pGL3-TNF-α3′端非翻译区（ UTR）双荧光素酶报告基因（ DLR）表达系统,以此基于调控TNF-α转录后水平对丹参酮类成分进行筛选。方法反转录人脐静脉内皮细胞HUVEC的mR

【作者】

：

韦忠红朱智杰刘玉萍刘兆国盛晓波汪思亮陶丽祝娉婷

【机构】

：

南京中医药大学药学,江苏省药效与安全性评价重点实验室

【出处】

：

中国药理学通报

【发表日期】

：

2015年1期

【关键词】

：

TNF-Α 3′非编码区双荧光素酶报告基因转录后调控隐丹参酮药物筛选 TNF-α 3′UTRdual luciferase reporterpost-t

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No 81173174,81202655）,教育部博士点基金（No 20113237110008）,江苏高校优势学科建设工程资助项目

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目的：构建并鉴定pGL3-TNF-α3′端非翻译区（ UTR）双荧光素酶报告基因（ DLR）表达系统,以此基于调控TNF-α转录后水平对丹参酮类成分进行筛选。方法反转录人脐静脉内皮细胞HUVEC的mRNA成cDNA,以之为模板,PCR扩增含TNF-α3′-UTR的DNA片段全长,经酶切后连接至荧光素酶报告载体pGL3-control上,构建出pGL3-TNF-α3′UTR全长的荧光素酶报告基因载体并进行鉴定。将所构建的pGL3-TNF-α3′UTR与pSVRenilla质粒组成双荧光素酶报告系统共转染至单

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