【摘 要】
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目的利用马丁达比犬的肾近曲小管上皮细胞(MD-CK)研究葛根素跨膜转运的机制。方法将MDCK按5×104个/cm2接种在悬挂式培养皿上培养至细胞生长分化成符合要求的细胞单层,用Mill
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目的利用马丁达比犬的肾近曲小管上皮细胞(MD-CK)研究葛根素跨膜转运的机制。方法将MDCK按5×104个/cm2接种在悬挂式培养皿上培养至细胞生长分化成符合要求的细胞单层,用Millicell-ERS测量细胞单层的电阻值以确定细胞单层的完整性和致密性,改变葛根素的浓度、转运方向、温度以及加入P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米进行跨膜转运实验并用高效液相色谱(HPLC)测定葛根素的含量,计算表观渗透系数(Papp)分析葛根素的跨膜转运机制。结果 80 mg/L葛根素在37℃和4℃下,A→B方向上的Papp分别是(2.36±0.12)×10-6、(6.10±0.36)×10-7cm/s,而在B→A方向上则分别为(9.24±0.75)×10-7、(2.14±0.25)×10-7 cm/s。37℃下当加入维拉帕米之后80 mg/L葛根素的吸收Papp上升到(5.74±0.28)×10-6cm/s。结论葛根素的跨膜过程有多种转运机制参与,不仅包括简单扩散还有能量依赖的主动转运,同时呈现出明显的方向性,P-gp对葛根素的吸收有抑制作用。
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