猪细小病毒NS1基因的克隆及表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guipaeren
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根据Bergeron等报道的猪细小病毒基因组序列设计引物,在下游引物中引入Bgl Ⅱ酶切位点以便于构建表达栽体.利用PCR技术扩增得到NS1全基因,将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定并分析,进而构建重组转移栽体pFast-NS1,,在DH10Bac大肠杆菌中与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)基因组(Bacmid)发生同源重组,获得重组穿梭载体Bacmid-NS1,经脂质体介导转染Sf9细胞后,得到重组杆状病毒(AcNPV-NS1).SDS-PAGE、West-ern-blotting分
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