【摘 要】
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咖啡酸-3-O-甲基转移酶(COMT)与咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因分别编码植物木质素生物合成中不同底物水平的甲基化酶, 构建了它们的单价与双价反义表达载体, 并用
【机 构】
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中国科学院植物研究所,北京市农林科学院农业生物技术中心
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咖啡酸-3-O-甲基转移酶(COMT)与咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因分别编码植物木质素生物合成中不同底物水平的甲基化酶, 构建了它们的单价与双价反义表达载体, 并用农杆菌介导转化烟草. PCR-Southern检测表明外源基因已整合到烟草基因组DNA中; Northern点杂交结果表明外源基因在烟草中以转录水平表达. 对表达单个及两个甲基化酶反义基因的成熟转基因植株的木质素含量测定结果表明, 反义抑制COMT与CCoAOMT的表达均使转基因植株的木质素含量下降, 但单独抑制CCoAOMT表达引起的下降幅度明显大于COMT, 并且两个基因同时被抑制时, 降低幅度更大, 说明它们具有协同效应. 组织化学染色结果说明COMT被抑制引起紫丁香基(S)木质素显著减少. 上述结果表明, 抑制植物内源CCoAOMT表达是反向调控转基因植物木质素生物合成及改良造纸资源植物的有效途径.
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