评价转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在富氢保存液减轻大鼠供肾低温保存期缺血损伤中的作用。
方法健康成年雄性Wistar大鼠40只，体重200～250 g，采用随机数字表法将其分为4组(n＝10)：正常对照组(C组)、保存液(UW液)组(UW组)、富氢UW液组(HRUW组)、Nrf2抑制剂全反式维甲酸组(ATRA组)。ATRA组腹腔注射全反式维甲酸7 mg/kg，1次/d，连续2 d，最后1次给药后8 h时制备肾游离及冷保存期缺血损伤模型，肾脏在4 ℃富氢UW液中保存48 h。UW组和HRUW组腹腔注射等容量生理盐水替代，肾脏分别在4 ℃ UW液和富氢UW液中保存48 h。取肾组织，HE染色观察病理学结果，行肾小管损伤评分；采用ELISA法测定肾组织TNF-α、IL-1β、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、IL-10及8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)的含量；采用分光光度法测定SOD和过氧化氢酶(CAT)活性；采用Western blot法测定肾组织Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达。
结果与C组比较，UW组肾小管损伤评分升高，肾组织TNF-α、IL-1β、HMGB1和8-iso-PGF2α含量升高，IL-10含量降低，Nrf2和HO-1表达上调，SOD和CAT活性降低，Bcl-2表达下调，Bax和caspase-3表达上调(P<0.05或0.01)；与UW组比较，HRUW组肾小管损伤评分降低，肾组织TNF-α、IL-1β、HMGB1和8-iso-PGF2α含量降低，IL-10含量升高，Nrf2和HO-1表达上调，SOD和CAT活性升高，Bcl-2表达上调，Bax和caspase-3表达下调，ATRA组肾组织Nrf2和Bcl-2表达上调(P<0.05)，其余指标差异无统计学意义(P>0.05)。与HRUW组比较，ATRA组肾小管损伤评分升高，肾组织TNF-α、IL-1β、HMGB1和8-iso-PGF2α含量升高，IL-10含量降低，HO-1和Bcl-2表达下调，SOD和CAT活性降低，Bax和caspase-3表达上调(P<0.05)。
结论富氢保存液减轻大鼠供肾低温保存期炎性反应、氧化损伤和细胞凋亡，从而减轻缺血损伤的机制与激活Nrf2信号通路有关。