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为了简化纯化步骤,节约生产成本,笔者构建了能够胞外分泌鼠羧肽酶原B(proCPB)的重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a-OmpA-proCPB,并进行发酵优化。结果表明:在信号肽OmpA的引导下,proCPB成功分泌至胞外,激活后的羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB)比酶活为131.22 U/mg。通过单因素及正交试验对发酵工艺进行优化,得出最佳培养基组合为甘油7 g/L、复合氮源15 g/L、MgSO_44 mmol/L、山梨醇0.3 mol/L、NaCl 10 g/L;最