SEA和B7-1基因真核共表达载体的构建及在B16细胞的表达

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目的构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)和小鼠B7-1基因真核共表达载体.方法采用PCR和RT-PCR方法分别克隆了带B7-1跨膜区的SEA(SEA-B7tm)和小鼠B7-1基因,中间通过内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)序列的连接克隆至真核表达载体pcDNA3.1+.利用阳离子脂质体将重组质粒转染B16细胞,间接免疫荧光法检测B7-1和SEA分子在B16细胞膜表面的表达情况.结果测序结果与Genebank中公布的SEA、小鼠B7-1 cDNA序列相符,双标
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