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探讨基底细胞样乳腺癌细胞HCC1937中p21waf1抗凋亡机制。
方法采用RNAi技术干扰HCC1937乳腺癌细胞中p21waf1基因表达,以未做处理的HCC1937为对照1组,感染空白载体慢病毒的HCC1937为对照2组,感染p21waf1-shRNA慢病毒HCC1937为实验组。RTPCR、Western印迹检测各组p21waf1、bim基因的mRNA及蛋白表达。原位末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测各组的细胞凋亡。
结果实验组p21waf1基因mRNA及蛋白表达量分别为0.260±0.004、0.293±0.006,对照1组分别为0.879±0.028、0.483±0.071,对照2组分别为0.870±0.025、0.469±0.047,与两对照组相比,实验组p21 waf1基因mRNA及蛋白表达量均显著降低,均P<0.01。实验组bim基因mRNA及蛋白为0.420±0.013、0.355±0.007,对照1组分别为0.258±0.005、0.142±0.012,对照2组分别为0.259±0.002、0.147±0.013,与两对照组相比,实验组bim基因mRNA及蛋白表达量均显著增高,均P<0.001。实验组细胞凋亡系数为0.279±0.012,对照1组为0.145±0.008,对照组2为0.148±0.012,均P<0.001。
结论在基底细胞样乳腺癌细胞HCC1937中,p21waf1可通过抑制bim表达,发挥其抗线粒体凋亡功能。