猪δ冠状病毒N蛋白的可溶性表达与生物学活性分析

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究采用RT-PCR扩增猪δ冠状病毒(PDCoV)的核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N)基因,构建原核表达质粒pET-32a-N,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析对表达蛋白进行纯化,将纯化后的重组蛋白免疫小鼠,以PDCoV病毒包被酶标板,采用ELISA方法检测小鼠血清抗体,评价重组蛋白的免疫原性。结果显示,PDCoV重组N蛋白(~58 kDa)在0.2 mmol/L IPTG、20℃条件下诱导12 h表达效果最好,且以可溶性形式存在;表达蛋白经Ni柱纯化后能与抗PDCoV阳性血清发生特异性免疫印迹反应,且能够诱导小鼠产生抗PDCoV特异性抗体,具有良好的免疫原性和反应原性。本研究为下一步建立PDCoV检测方法和开展PDCoV N蛋白功能研究奠定了基础。
其他文献
公校私营是一种公共部门与私营部门合作教育供给新模式,将私营部门引入公立教育体系,有利于创新发展动力,改善教育发展中的结构性困境;利于强化学校自主权,提高校本管理水平;同时加强公私协作,实现优势互补。但公校私营制度实施也存在三个方面的局限性:一是资本逐利性与教育公益性之间的矛盾;二是私营部门自身专业性制约办学成效;三是公私之间权责边界不清晰等问题与局限。基于此,我国公校私营制度的实施就是要对上述藩篱
期刊
阐述以西门子S7-200 Smart PLC为核心控制器,结合步进电机、气动驱动、触摸屏技术和传感器技术,设计一种满足工业生产线产品立体入库的三轴机械手控制系统。
期刊
报纸
预期功能安全旨在降低由于功能定义不充分、功能不足或者人为误用导致的风险。预期功能安全风险往往在一定的触发条件诱导下产生,感知系统在不同触发条件下的表现直接影响行车安全。本文首先简要分析了感知系统的触发条件,选取路口直行车辆冲突场景作为基础场景,在基础场景上增加各类触发条件获得测试场景;其次介绍了综合量化评价方法;最后在仿真环境中搭建了测试场景,并对某款带有目标感知功能的视觉传感器进行了评价。
期刊
文章介绍了汽车功能安全发展趋势,包括汽车功能安全市场趋势、汽车功能安全法规趋势及汽车功能安全技术趋势。随着汽车行业软件定义汽车时代的到来,汽车功能安全将会成为不可或缺的关键部分。
期刊
<正>近年来,随着我国经济的持续发展,超大规模的市场优势已成为稳定及拉动经济发展的基石,在此背景下,消费金融作为一种全新的信贷模式应运而生并得到了持久发展,本文在基于消费金融发展的基础上,就完善相关的法律体系进行了思考,提出了意见和建议。消费金融作为一种新兴的信贷模式,与传统金融活动不同,消费金融是以个人信用为依托,向个人提供生活消费范围内小额、分散的借贷服务。在风险可控的情况下,通过消费金融方式
期刊
“双减”工作是一项系统工程,需要统筹学校、社会、家庭力量,形成协同育人格局,以保证“双减”政策落地。针对家庭教育被学校教育同化、社会教育被课外辅导替代的情况,应整体构建协同育人课程,使家庭教育和社会教育以系统化方式呈现,能够持续、深入地开展,达到减负提质、协同育人的效果。课程开发要根据教育实践的需要,明确不同教育实践主体的课程体系建设方向和路径。家庭、学校、社会课程的实施路径存在交叉融合,学校除了
期刊
预期功能安全的提出,使得传统的自动紧急制动系统的安全性受到了挑战。为此,本文中利用基于系统理论过程分析(systems-theoretic process analysis,STPA)方法得到了自动紧急制动系统的预期功能安全要求,在传统的自动紧急制动系统基础上增加了感知盲区安全车速规划策略。然后基于盲区场景下车辆与行人相遇运动学模型,构造盲区安全车速公式。接着设计加入非线性干扰观测器的速度滑模控制
期刊
<正>疼痛是肿瘤患者常见的伴随症状,成为影响肿瘤患者生活质量的重要因素。为进一步规范癌痛诊疗行为,提高癌痛规范化治疗水平,改善肿瘤患者生活质量,原国家卫生部于2011年在全国范围内开展了“癌痛规范化治疗示范病房”创建活动,全国范围内绝大多数地区逐步建立了“癌痛规范化治疗示范病房”,明显提高了癌痛的规范化诊疗[1]。
期刊
<正>"双减"政策的出台是出于对儿童个体生命的尊重,对儿童主体地位和价值的肯定,是要求教育者践行一条剥离资本乱象、回归育人本源之路。当下,学校与家庭、社区之间的教育场域缺乏联通,"共育平台"大多停留在纸面方案上,没有找到协同育人的支撑点,未能实现家校社合力促进学生发展。此外,有研究表明,学校在人的成长过程中只有15%的作用,孩子成长、成功的因果关系是家庭,1可见家庭和社会教育对学生发展的影响更大。
会议