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目的研究重组人Ⅱ型胶原250270多肽(recombinant human collagen type Ⅱ peptide 250270,rhC Ⅱ 250270)对类风湿关节炎(RA)患者外周血特异性T细胞的活化作用,为口服耐受治疗RA提供研究材料和实验依据.方法不同浓度(0.1、1.0、10、100、1 000 μg/ml)的6聚rhCⅡ 250270 体外刺激RA患者外周血单个核细胞(PBMC);等浓度的融合表达的基础蛋白(GST)和磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为阴性对照;化学合成CⅡ250270和十四烷酰佛波醇乙酯(PMA)刺激组为阳性对照,体外培养1～6 d.流式细胞仪(FCM)测定刺激前后各组培养细胞中T(CD3+)淋巴细胞表面活化标志CD25的表达、5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)在DNA中的掺入及细胞因子干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4的分泌,以验证其对RA患者外周血特异性T细胞的活化作用.结果 rhCⅡ250270合适的刺激浓度为100 μg/ml,在此浓度下刺激4 d,RA患者外周血T细胞中CD25+、BrdU+细胞率分别为(17±4)%、(35±5)%,均显著高于同行对照GST组(P＜0.01),而和化学合成CⅡ250270刺激组差异无显著性(P＞0.05).同等条件下rhCⅡ 250-270刺激组T细胞中IL-4、IFN-γ阳性细胞率分别为(13.3±4.0)%、(6.0±2.1)%,与GST组相比显著升高(P＜0.01),略高于化学合成CⅡ 250270组,但差异无显著性(P＞0.05).结论重组人Ⅱ型胶原250270多肽在体外具有活化RA患者T细胞、促使其增生并分泌相应的细胞因子的特性,初步具有预期的免疫学活性.