【摘 要】
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目的观察共刺激分子B7-H3对食管癌细胞株Eca-109增殖、迁移及侵袭等细胞生物学特性的影响。方法慢病毒感染并经过流式分选，构建B7-H3稳定下调表达的Eca-109细胞(LV-B7-H3-siRNA)及对照组Eca-109细胞(LV-NC)，采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot验证B7-H3干扰后mRNA及蛋白的表达水平，细胞增殖实验、划痕实验及Tr
【机 构】
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213003 常州，苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心 苏州大学细胞治疗研究院,213003 常州，苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技
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目的观察共刺激分子B7-H3对食管癌细胞株Eca-109增殖、迁移及侵袭等细胞生物学特性的影响。
方法慢病毒感染并经过流式分选，构建B7-H3稳定下调表达的Eca-109细胞(LV-B7-H3-siRNA)及对照组Eca-109细胞(LV-NC)，采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot验证B7-H3干扰后mRNA及蛋白的表达水平，细胞增殖实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测并分析LV-B7-H3-siRNA组及LV-NC组Eca-109细胞的增殖、迁移及侵袭能力的差异。
结果通过RNA干扰(RNAi)技术成功构建B7-H3稳定下调表达的食管癌细胞株Eca-109。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测结果显示，细胞接种后第2天(0.31±0.03比0.36±0.02)、第4天(0.51±0.04比0.60±0.04)、第5天(0.60±0.02比0.70±0.03)、第6天(0.65±0.05比0.76±0.03)，LV-B7-H3-siRNA组的增殖速率低于LV-NC组，差异有统计学意义(P＝0.011、0.024)；划痕实验结果显示，在划痕后12 h[(38.0±28.1)比(467.7±30.3)像素]、20 h[(509.7±6.2)比(403.3±16.7)像素]、24 h[(454.7±19.9)比(355.0±32.1)像素]，LV-B7-H3-siRNA组Eca-109细胞的相对迁移距离高于LV-NC组，差异有统计学意义(P＝0.042、0.001、0.010)；Transwell侵袭实验表明，细胞接种24 h后，LV-B7-H3-siRNA组侵袭细胞数量[(258.8±29.1)个]，少于LV-NC组[(474.0±85.3)个]，差异有统计学意义(P＝0.014)。
结论成功构建B7-H3稳定下调表达的食管癌细胞株Eca-109，并证实B7-H3下调表达可显著抑制Eca-109细胞的增殖、迁移及侵袭能力，提示共刺激分子B7-H3参与调节食管癌细胞的生物学功能，并与肿瘤侵袭转移有关。
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