检测基孔肯雅病毒抗原方法的建立与初步评价

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czjjay
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

建立基孔肯雅病毒抗原检测方法。

方法

利用重组杆状病毒表达的基孔肯雅病毒全部结构蛋白组成的病毒样颗粒免疫小鼠和兔,制备了基孔肯雅病毒特异性多克隆抗体,建立了检测基孔肯雅病毒抗原双抗体夹心ELISA方法。优化了抗体使用浓度和ELISA反应条件,以灭活基孔肯雅病毒为阳性参考品评价了该方法的检测限和重复性。

结果

利用10份模拟阳性血清、90份阴性血清、40份其他病毒感染者急性期血清初步评价该方法的特异性、灵敏性。结果显示特异性为100%,检出限约为10TCID50,板间变异系数小于10%,板内变异系数小于5%。

结论

双抗体夹心ELISA方法可以用于检测急性期血清样本中基孔肯雅病毒抗原,为基孔肯雅热的病原学诊断提供了新的手段。

其他文献
目的探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPN)在类风湿性关节炎(RA)患者中的表达及其临床意义。方法选取本院住院RA患者32例和健康对照29例,抽取外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞。利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs) mRNA及蛋白的表达水平。同时检测外周血炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因
目的观察七氟醚对缺血再灌注心肌中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的影响并探讨PPAR-γ在七氟醚后处理减轻心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为4组(n=5):对照组(Control组)、七氟醚后处理组(SPostC组)、七氟醚后处理+PPAR-γ抑制剂组(SPostC+GW9662组)和PPAR-γ抑制剂组(GW9662组),各组均建立小鼠在体心肌
目的观察莪术醇对体外培养人膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡及果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)表达的影响,并探讨其分子机制。方法使用不同浓度莪术醇(12.5、25.0、50.0、100.0 mg/L)及含1%无水乙醇培养基的对照组干预处理人膀胱癌EJ细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的增殖能力,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,反转录
目的观察阿托伐他汀预处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞保护作用,并探讨其作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组(A组,n=10)、心肌缺血再灌注损伤组(B组,n=10)、阿托伐他汀灌胃预处理组(C组,20 mg/d;D组,40 mg/d)。除A组外均建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠心肌细胞病理学改变;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测
目的观察糖尿病(DM)对小鼠腹主动脉瘤(AAA)组织中组织蛋白酶S(Cathepsin S)及其抑制剂胱抑素C(Cystatin C)表达的影响。方法将16只载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)的C57BL/6小鼠随机分为DM+AAA组(n=8)与AAA组(n=8)并构建相应的疾病模型。通过超声观察两组小鼠最大腹主动脉直径的变化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组小鼠血浆Cystatin
血管外科作为迅速发展的学科之一,其疾病谱随着社会的发展和人口老年化的进程在不断的改变,如主动脉疾病、动脉粥样硬化性疾病、深静脉血栓栓塞性疾病等,逐渐形成了各大血管外科诊治中心的主要病种。本文以主动脉疾病、周围动脉疾病、周围静脉疾病和药物治疗等四个方面,简要介绍近期血管外科基础研究的部分研究热点。
目的探讨不同核酸提取方法以及不同实时荧光定量PCR仪检测结果之间的差异。方法随机挑选呼吸道、肠道病毒阳性标本各25份,采用3种方法(方法A、B、C)进行核酸提取,比较不同核酸提取方法之间的差异;随机挑选呼吸道、肠道病毒阳性核酸各25份,在3种实时荧光定量PCR仪(仪器A、B、C)上进行实时荧光定量PCR,比较不同实时荧光定量PCR仪之间的差异。检测结果采用定量资料的随机区组方法分析。结果3种核酸提
目的探讨儿童多发性大动脉炎的临床特征和感染情况,提高对此病的认识。方法回顾性分析24例儿童多发性大动脉炎患儿的临床资料。结果24例患儿平均发病年龄为9.3±3.2岁,男女比为1∶3。临床分型中以胸腹主动脉型最多(54.2%),常以血压升高、头晕头痛、发热、乏力等为首发症状。6例伴有结核感染,其中1例为肺结核。抗链O水平升高3例(8.3%),EB病毒感染2例(8.3%),细小病毒B19感染1例(4.
目的分析2014年7月到2015年6月云南省昆明市全年龄组腹泻人群A组轮状病毒的感染状况及病原学特征,为A组轮状病毒感染的监测、防控及暴发病例的调查及疫苗研发提供基础数据和方法学参考。方法采集云南省4个监测哨点医院全年龄组腹泻人群的粪便样本1 121份、非腹泻人群的粪便319份。提取样本RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定A组轮状病毒阳性,对于阳性样本,进一步进行半巢式多重RT-PCR法
目的检验生物安全三级实验室(BSL-3)经常使用的2种防护型口罩(3M9332、3M1860)对于工作人员的适合性,确保其能够佩戴适合自己脸型的防护口罩,保障在实验过程中得到切实有效的保护,从而降低其在操作高危病原微生物过程中感染的风险。方法使用口罩密合度检测仪器TSI PortaCountPro+ 8038,检测工作人员佩戴3M9332、3M1860 2种型号口罩的适合性。并对适合性检测过程中的